Question

如何选购ELISA试剂

Answer 1

　　在国内生物研究蓬勃发展的现在，假冒无视科学研究的严谨性和严肃性，让广大的科研工作者被动造假，严重破坏了科研氛围，扰乱了市场秩序，联科生物整理了一些鉴别这些假冒伪劣ELISA试剂盒的方法，供广大的科研工作者和用户参考，让希望对广大科研工作者有所帮助。
　　购买前
　　【方法一】向厂家索要或从其网站下载说明书，查找ELISA的性能指标：准确度(加标回收率、稀释线性)、精密度(板内差、板间差)、灵敏度、样本值、特异性、校准。一般来说，除了校准不一定每份说明书都有外，其余的指标一般都需要罗列(部分样本需要高倍稀释的，可能没有准确度这个指标)。如果无法提供这些性能指标，则说明该试剂盒可能是假货，或者试剂盒开发过程不够科学严谨，有可能无法检测出真实的样本值。
　　【方法二】对于夸大ELISA涵盖的指标的范围，尤其是不常见的种属，可先去国际知名ELISA试剂盒供应商(如eBioscience、R&D)网站上搜索，如果搜索不到该种属的ELISA试剂盒，则有可能是假货，需要小心谨慎。
　　【方法三】将“厂家名”、“ELISA”和“假货”等关键词在网上搜索，有的网站或论坛如丁香园等会有打假曝光台。
　　购买后
　　【方法一】检查说明书、包装盒的质量，通常假冒伪劣产品为了降低成本，印刷的质量会比较差。其次仔细阅读说明书，如上所示查找ELISA的性能指标。
　　【方法二】
　　Ⅰ.
利用干扰实验即可鉴别ELISA试剂盒是否检测目的抗原，方法如下：
　　(1)
将针对试剂盒特异性的重组蛋白抗原和试剂盒中的检测抗体配置成antibody:
antigen=
1:2的混合孵育液
　　(2)
37℃孵育15分钟后，代替原试剂盒中的检测抗体
　　(3)
后续操作按照试剂盒说明书进行，加检测抗体、酶复合物和底物
　　(4)
实验完毕后，检测其标准曲线，如果标准曲线良好则说明加入的目的抗原和试剂盒抗体不匹配，试剂盒检测抗体针对的是非目的抗原，该试剂盒为伪劣假造ELISA试剂盒。
　　(5)
如果标准曲线无线性，则说明试剂盒检测抗体已被目的抗原中和或干扰，影响了其实际试剂盒抗体的检测作用，则该试剂盒检测抗体针对的是目的抗原。
　　Ⅱ.如果购买了两盒同一公司的ELISA试剂盒A和B，利用交叉实验即可鉴别ELISA试剂盒是否造假，方法如下：
　　(1)
取出购买的试剂盒A的包被板两条。
　　(2)
一条包被板加试剂盒A的标准品做标准曲线。
　　(3)
另一条包被板加试剂盒B的标准品做标准曲线。
　　(4)
后续操作按照试剂盒说明书进行，加检测抗体、酶复合物和底物。
　　(5)
实验完毕后，检测两条标准曲线，如果两条标准曲线一致则说明两个ELISA试剂盒检测的同一个指标而非A和B，即该试剂盒为伪劣假造ELISA试剂盒。
　　(6)
如果两条标准曲线不一致则说明两个ELISA试剂盒检测的不同指标，试剂盒A只能检测A，不能检测B，即该试剂盒为正常的ELISA试剂盒。