植物的叶片中提取大分子的 DNA并验证实验结果
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您好！以下是植物叶片中提取大分子DNA的实验步骤和验证方法：
提取方法：CTAB法
1. 将新鲜叶片在液氮中研磨，破碎细胞。
2. 加入CTAB分离缓冲液，溶解DNA。
3. 经氯仿-异戊醇抽提，去除蛋白质。
4. 得到DNA。
验证方法：定磷法
定磷法是对样品中核酸（DNA和RNA）含量的准确定量。具体步骤如下：
1. 将样品中的核酸用强酸（硫酸或高氯酸）消化成无机磷。
2. 用定磷试剂对生成的无机磷酸进行滴定。
3. 定磷试剂是酸性钼酸铵溶液，能与无机磷酸定量结合成磷钼酸络合物。
4. 该络合物被抗坏血酸等还原剂还原成蓝色的钼蓝。
5. 在660mm处有最大光吸收。
希望对您有所帮助！
咨询记录 · 回答于2024-01-18
植物的叶片中提取大分子的 DNA并验证实验结果
我想知道怎么检验实验结果
验证
植物叶片中提取大分子DNA并验证实验结果
CTAB法是一种快速简便的提取植物总DNA的方法：
1. 将新鲜的叶片在液氮中研磨，破碎其细胞。
2. 加入CTAB分离缓冲液，将DNA溶解出来。
3. 经氯仿-异戊醇抽提除去蛋白质。
4. 最后得到DNA。
验证：
定磷法：是对样品中核酸（DNA和RNA）含量的准确定量。
1. 将样品中的核酸用强酸（硫酸或高氯酸）消化成无机磷。
2. 用定磷试剂对生成的无机磷酸进行滴定。
3. 定磷试剂是酸性钼酸铵溶液，能与无机磷酸定量结合成磷钼酸络合物。
4. 该络合物能被抗坏血酸等还原剂还原成兰色的钼蓝。
5. 在660mm处有最大光吸收。
亲，在DNA提取、制备的过程中，需要注意以下几点：
1. 化学因素
* 核酸的结构在pH值4.0—11.0间较为稳定。如果pH值在此范围外，核酸的结构可能会被破坏并发生降解。因此，制备过程应避免过酸或过碱的环境。
2. 物理因素
* DNA分子链很长，具有双螺旋结构。这种结构使其具有一定的柔性和刚性。如果受到强烈的机械作用，如剧烈搅拌，DNA分子可能会断裂，不利于后续的收集工作。因此，在制备过程中应避免剧烈的搅拌等机械作用。
，在DNA提取、制备的过程中，需要注意以下几点：
1. 化学因素
* 核酸的结构在pH值4.0—11.0间较为稳定。如果pH值在此范围外，核酸的结构可能会被破坏并发生降解。因此，制备过程应避免过酸或过碱的环境。
2. 物理因素
* DNA分子链很长，具有双螺旋结构。这种结构使其具有一定的柔性和刚性。如果受到强烈的机械作用，如剧烈搅拌，DNA分子可能会断裂，不利于后续的收集工作。因此，在制备过程中应避免剧烈的搅拌等机械作用。
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