荧光标记法和同位素标记法区别是什么?
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同位素标记法和荧光标记法的区别:
1、标记不同:同位素标记法通常采用放射性同位素标记物质中的分子原子,荧光标记法通常是借助荧光分子来标记蛋白质。一个是元素标记,另一个是分子标记。
2、分子不同:现代分子生物学技术能够用特定的分子,与染色体上某一个基因结合,这个分子又能够被带有荧光标记的物质识别,通过荧光显示,就可以知道基因在染色体上的位置。
从生物教学谈荧光蛋白和荧光标记法实验:
首先用荧光染料标记抗体∶将小鼠的抗体与发绿色荧光的荧光素(fluorescin)结合,人的抗体与发红色荧光的罗丹明(rhodamine)结合。然后,是将小鼠细胞和人细胞在灭活的仙台病毒的诱导下进行融合。最后,将标记的抗体加入到融合的人、鼠细胞中,让这些标记抗体同融合细胞膜上相应的抗原合。
开始,融合的细胞一半是红色,一半是绿色。在37℃下40分钟后,两种颜色的荧光在融合的杂种细胞表面呈均匀分布,这说明抗原蛋白在膜平面内经扩散运动而重新分布。
这种过程不需要ATP。如果将对照实验的融合细胞置于低温(1℃)下培育,则抗原蛋白基本停止运动。这一实验结果令人信服地证明了膜整合蛋白的侧向扩散运动。
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