什么是内参基因?常用内参基因有哪些?
内参基因是一种在生物学研究中常用的基因,主要用于标准化实时定量PCR等实验,以反映样本之间的相对表达量。
常用内参基因包括以下几种:
1. β-肌动蛋白:
β-肌动蛋白是细胞骨架中的主要组成部分。由于其几乎在所有细胞中都有表达,并且表达水平相对稳定,因此常被用作内参基因。它在实时定量PCR实验中能够很好地反映目标基因的表达水平。
2. 甘油醛-3-磷酸脱氢酶:
GAPDH是糖代谢过程中的关键酶。其表达水平在大多数组织中都很高且相对稳定,因此也被广泛应用于实时定量PCR实验作为内参基因。
3. 18S rRNA:
18S rRNA是真核生物中核糖体RNA的一部分,其表达水平在大多数细胞中都非常高且相对稳定。由于其分子量较小,在PCR扩增过程中表现出较高的效率,因此也常被用作内参基因。
4. β-葡糖醛酸糖苷酶:
β-葡糖醛酸糖苷酶是微管蛋白的一种,参与细胞骨架的形成。其表达水平相对恒定,也常被用于标准化实验。
内参基因的主要作用是确保实验结果的可靠性和准确性。在实时定量PCR实验中,通过比较目标基因与内参基因的表达量,可以计算出目标基因的相对表达水平。不同的内参基因在不同的实验条件下可能会有不同的表现,因此选择合适的内参基因对于获得准确的实验结果至关重要。
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