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如何配置牛肉膏蛋白胨培养基来检测饮用水中的细菌数 ?
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牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用广泛和最普通的细菌基础培养基,又称普通培养基。它含有一般细菌生长繁殖所需要的最基本的营养物质,可供微生物生长繁殖之用。基础培养基含有牛肉膏、蛋白胨和NaCI。其中牛肉膏为微生物提供碳源、能源、磷酸盐和维生素,蛋白胨主要提供氮源和维生素,而NaCI提提供无机盐。在配制固体培养基时还要加入一定量的琼脂作为凝固剂。
由于这种培养基多用于培养细菌,因此要用稀酸或稀碱将其PH调至碱性,以利于细菌的生长繁殖。
牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下:
牛肉膏
3.0g
NaCI
5.og
蛋白胨
10.0g
水
1000ml
pH
7.4~7.6
三、
操作器材
(1)溶液与试剂
牛肉膏,蛋白胨,NaCI,琼脂,1mol/LNaOH,1mol/LHCI。
(2)仪器及其他用具
试管,锥形瓶,烧杯,量筒,玻璃棒培养基分装器,,天平,高压蒸汽灭菌器,PH试纸,棉花,牛皮纸,麻绳,纱布等。
四、操作步骤
1、称量
按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCI放入烧杯中。
2、融化
在上述烧杯中先加入少于所需要的水量,用玻璃棒搅匀。然后加热使其溶解。各试剂完全溶解后,补充水到所需的总体积。配制固体培养基时,将称好的琼脂放入已溶的试剂中,在加热融化,最后补充所损失的水分。
3、调pH
用试纸测培养基的原始PH,如果偏酸,用滴管向培养基中加入1mol/LNaOH,边滴边搅拌,并随时用pH试纸测其pH,直至pH达7.6。反之,用1mol/LHCI进行调节。
4、分装和加塞
将配制的培养基分装入试管内,在试管口或锥形瓶口上塞上棉塞。
5、包扎
加塞后,将全部试管用麻绳捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,其外再用一根麻绳扎好。用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
6、灭菌
将上述培养基以1210C,20min,0.103MPa高压蒸汽灭菌。
7、搁置斜面
将灭菌的试管培养基冷却至500C左右,将试管口端搁在玻璃棒上。斜面的斜度要适当,使斜面的长度约为管长
1/3。
8、无菌检查
将灭菌培养基放入370C的培养箱中培养24~28h,以检查灭菌是否彻底。
由于这种培养基多用于培养细菌,因此要用稀酸或稀碱将其PH调至碱性,以利于细菌的生长繁殖。
牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下:
牛肉膏
3.0g
NaCI
5.og
蛋白胨
10.0g
水
1000ml
pH
7.4~7.6
三、
操作器材
(1)溶液与试剂
牛肉膏,蛋白胨,NaCI,琼脂,1mol/LNaOH,1mol/LHCI。
(2)仪器及其他用具
试管,锥形瓶,烧杯,量筒,玻璃棒培养基分装器,,天平,高压蒸汽灭菌器,PH试纸,棉花,牛皮纸,麻绳,纱布等。
四、操作步骤
1、称量
按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCI放入烧杯中。
2、融化
在上述烧杯中先加入少于所需要的水量,用玻璃棒搅匀。然后加热使其溶解。各试剂完全溶解后,补充水到所需的总体积。配制固体培养基时,将称好的琼脂放入已溶的试剂中,在加热融化,最后补充所损失的水分。
3、调pH
用试纸测培养基的原始PH,如果偏酸,用滴管向培养基中加入1mol/LNaOH,边滴边搅拌,并随时用pH试纸测其pH,直至pH达7.6。反之,用1mol/LHCI进行调节。
4、分装和加塞
将配制的培养基分装入试管内,在试管口或锥形瓶口上塞上棉塞。
5、包扎
加塞后,将全部试管用麻绳捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,其外再用一根麻绳扎好。用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
6、灭菌
将上述培养基以1210C,20min,0.103MPa高压蒸汽灭菌。
7、搁置斜面
将灭菌的试管培养基冷却至500C左右,将试管口端搁在玻璃棒上。斜面的斜度要适当,使斜面的长度约为管长
1/3。
8、无菌检查
将灭菌培养基放入370C的培养箱中培养24~28h,以检查灭菌是否彻底。
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2022-08-05 广告
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