为什么提取RNA的浓度总是太低rna.提取称
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rna.提取
称取鲜酵母
159或干酵母粉
2.5g,倒入
100ml三角瓶中,加
nacl
2.5g,水25ml,搅拌均匀,置于沸水浴中提取lh。
2.分离
将上述提取液用自来水冷却后,装入大离心管内,以4000r/min离心10min,使提取液与菌体残渣等分离。
3.沉淀rna
将离心得到的上清液倾于50ml烧杯内,并置入放有冰块的250ml烧杯中冷却.待冷至10℃以下时,用6mol/l
hci
小心地调节ph值至2.0~2.5(注意严格控制ph)。调好后继续于冰水中静置10min,使沉淀充分,颗粒变大。
4.洗涤和抽滤
上述悬浮液以
4000r/min离心
10min,得到
rna沉淀。将沉淀物放在
10ml小烧杯内,用95%的乙醇
5~10ml充分搅拌洗涤,然后在布氏漏斗上用射水泵抽气过滤,再用
95%乙醇5~10ml淋洗
3次。
5.干燥
从布氏漏斗上取下沉淀物,放在6cm表面皿上,铺成薄层,置于80℃烘箱内干燥。将干燥后的rna制品称重,存放于干燥器内。
应该是这里的某个步骤错了吧!
称取鲜酵母
159或干酵母粉
2.5g,倒入
100ml三角瓶中,加
nacl
2.5g,水25ml,搅拌均匀,置于沸水浴中提取lh。
2.分离
将上述提取液用自来水冷却后,装入大离心管内,以4000r/min离心10min,使提取液与菌体残渣等分离。
3.沉淀rna
将离心得到的上清液倾于50ml烧杯内,并置入放有冰块的250ml烧杯中冷却.待冷至10℃以下时,用6mol/l
hci
小心地调节ph值至2.0~2.5(注意严格控制ph)。调好后继续于冰水中静置10min,使沉淀充分,颗粒变大。
4.洗涤和抽滤
上述悬浮液以
4000r/min离心
10min,得到
rna沉淀。将沉淀物放在
10ml小烧杯内,用95%的乙醇
5~10ml充分搅拌洗涤,然后在布氏漏斗上用射水泵抽气过滤,再用
95%乙醇5~10ml淋洗
3次。
5.干燥
从布氏漏斗上取下沉淀物,放在6cm表面皿上,铺成薄层,置于80℃烘箱内干燥。将干燥后的rna制品称重,存放于干燥器内。
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研载生物科技(上海)有限公司_
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