Question

单克隆转染细胞的筛选通常的步骤。

Answer 1

【答案】：单克隆转染细胞的筛选通常的步骤是：在转染24小时后，利用遗传霉素进行新霉素抗性基因的筛选；稳定筛选2周后，在肉眼观察下将形成的单克隆细胞簇消化，制备成单细胞悬液；逐一将单个细胞置于96孔板培养；待单克隆长到相对较大的集落后，于显微镜下挑取细胞集落，转移到24孔板培养；当获得足量细胞时，消化收集细胞，一半用于冻存，另一半用于进行阳性细胞株鉴定。