Question

在高效液相色谱分析中，如果基线不稳定，是什么原因引起的

Answer 1

高效液相色谱仪分析中的基线不稳定的原因一般是硬件引起的可以从两个大方向去判断：

1、产品质量方面的故障：仪器本身的电噪声，仪器无法屏蔽产品的外部信号的干扰信号，工作站软件的信号线连接时接触非仪器方面的输入信号，都会引起基线的规则性波动和突发性波动；这种不稳定一般可以通过基线信号的规律判断出来的；

2、使用和维护范围内的基线不稳定：流动相流路中有气泡会引起规律性的小波动；色谱柱污染则会导致基线大幅度的波动和各种不规则的出峰，检测器污染也会导致基线的不稳定1、柱温波动。（即使是很小的温度变化 都会引起基线的波动。通常影响示差检测 器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测 器或其它光电类检测器。） 1、控制好柱 子和流动相的温度，在检测器之前使用热 交换器图 2、流动相不均匀。（流动相条件变化引 起的基线漂移大于温度导致的漂移。） 2 、使用HPLC级的溶剂，高纯度的盐和添 加剂。流动相在使用前进行脱气，使用中 使用氦气。 3、流通池被污染或有气体 3、用甲醇或 其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要， 可以用1N的硝酸。（不要用盐酸） 4、检测器出口阻塞。（高压造成流通池 窗口破裂，产生噪音基线） 4、取出阻塞 物或更换管子。参考检测器手册更换流通 池窗。 5、流动相配比不当或流速变化 5、更改 配比或流速。为避免这个问题可定期检查 流动相组成及流速。 6、柱平衡慢，特别是流动相发生变化时 6、用中等强度的溶剂进行冲洗，更改流 动相时，在分析前用10-20倍体积的新流 动相对柱子进行冲洗。 7、流动相污染、变质或由低品质溶剂配 成 7、检查流动相的组成。使用高品质的 化学试剂及HPLC级的溶剂 8、样品中有强保留的物质（高K 值）以 馒头峰样被洗脱出，从而表现出一个逐步 升高的基线。 8、使用保护柱，如有必要 ，在进样之间或在分析过程中，定期用强 溶剂冲洗柱子。 9、使用循环溶剂，但检测器未调整。 9 、重新设定基线。当检测器动力学范围发 生变化时，使用新的流动相。 10、检测器没有设定在最大吸收波长处，将波长调整至最大吸收波长处

Answer 2

高效液相色谱仪分析中的基线不稳定的原因一般是硬件引起的可以从两个大方向去判断：
1、产品质量方面的故障：仪器本身的电噪声，仪器无法屏蔽产品的外部信号的干扰信号，工作站软件的信号线连接时接触非仪器方面的输入信号，都会引起基线的规则性波动和突发性波动；这种不稳定一般可以通过基线信号的规律判断出来的；
2、使用和维护范围内的基线不稳定：流动相流路中有气泡会引起规律性的小波动；色谱柱污染则会导致基线大幅度的波动和各种不规则的出峰，检测器污染也会导致基线的不稳定。

Answer 3

高效液相色谱仪分析中的基线不稳定的原因一般是硬件引起的可以从两个大方向去判断：

1、产品质量方面的故障：仪器本身的电噪声，仪器无法屏蔽产品的外部信号的干扰信号，工作站软件的信号线连接时接触非仪器方面的输入信号，都会引起基线的规则性波动和突发性波动；这种不稳定一般可以通过基线信号的规律判断出来的；

2、使用和维护范围内的基线不稳定：流动相流路中有气泡会引起规律性的小波动；色谱柱污染则会导致基线大幅度的波动和各种不规则的出峰，检测器污染也会导致基线的不稳定。

Answer 4

高效液相色谱仪分析中的基线不稳定的原因

1. 柱温波动：即使是很小的温度变化都会引起基线的波动，通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。使用柱温箱，控制好柱子和流动相的温度，在检测器之前使用热交换器。

2. 流动相不均匀：流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。使用HPLC级的溶剂，流动相在使用前进行脱气处理。

3. 流通池被污染或有气体：用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要，可以用1N的硝酸(不要用盐酸)。

4. 流动相配比不当或流速变化：更改配比或流速，为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。

5. 样品中有强保留的物质：以馒头峰样被洗脱出，从而表现出一个逐步升高的基线。使用保护柱，如有必要，在进样之间或在分析过程中，定期用强溶剂冲洗柱子。

Answer 5

示差检测器很容易不稳定，因为它的参比池和样品池之间很容易有产生波动差。
它的高灵敏度对周围环境的要求很高，对温度，对噪音，对电信号都会比较敏感。尤其是温度，如果不稳定的话，基线会一直漂移，所以最好控制柱温。
通常在开始实验之前，先要长时间地冲洗参比池，然后在参比池和样品池之间切换，基线呈台阶状就算是稳定了。
如果，你的流动相里有易挥发的试剂，那么做实验的中间可以在切换到参比池，冲洗半小时。