Question

什么是米氏方程？其中的米氏常数有何意义？米数常数如何测定

Answer 1

米氏方程表示一个酶促反应的起始速度与底物浓度关系的速度方程Km的意义及应用（1）、活性中心被底物占据一半时的底物浓度。当V=1/2Vmax时，Km=[S]。（2）、Km是特征常数，一般只与酶的性质、底物种类及反应条件有关，与酶的浓度无关。（3）、Km可近似表示表示酶与底物的亲和力Km=(K2+K3)/K1=Ks+K3/K1当K1、K2>>K3时，Km近似等于Ks，因此，1/Km可近似表示酶与底物的亲和力大小（4）、Km与天然底物Km最小或最高Vm/Km比值的底物称之为该酶的最适底物或天然底物。（5）、已知Km，可根据[S]推算V，或由V推算[S]（6）、了解酶的Km及[S]推知是否受[S]调节（7）、用于鉴别原级同工酶、次级同工酶。（8）、测定不同抑制剂对某个酶的Km值的影响判断抑制类型（非竞争性抑制剂米氏常数不变，最大反应速度减小；竞争性抑制剂米氏常数增大，最大反应速度不变。）（9）、催化可逆反应的酶：测定Km和[S]推测催化反应的方向及程度。测定Km一般用作图法求得。作图法有很多，最常用的是Linewaver-Burk作图法，该法是根据米氏方程的倒数形式，以1/v对1/[S]作图，可得到一条直线。直线在横轴上的截距为 -1/Km可求出Km