基因组文库的概念
基因组文库是指将某生物的全部基因组DNA切割成一定长度的DNA片段克隆到某种载体上而形成的集合。
基因组文库简介
1、用限制性核酸内切酶切割细胞的整个DNA,可以得到大量的DNA片段,然后将这些DNA片段与载体连接,再转移到细菌中去,让宿主菌长成后进行克隆。
2、每个克隆的细胞的载体上都包含有特定的基因组DNA片段,整个克隆群体就包含基因组的全部基因片段总和称为基因组文库。
基因组文库最小值
1、一个理想的基因组文库要有足够多的克隆子数,以保证所有的基因都在克隆子群体中。为了获得某种基因需要构建的基因组文库的最小值可按下面的经验公式估算:N等于ln(1减P)除于ln(1减f)
2、公式中,N表示基因组文库必须的克隆子数;P表示文库中目的基因出现的频率,一般情况下,期望值为99%,即0.99;f是克隆的DNA片段平均大小与基因组大小的比值。
重组DNA不同处及基因组文库来源:
一、重组DNA不同处
1、重组DNA片段来源不同,基因组文库:来源于某特定生物个体的基因组DNAcDNA文库,来源于细胞中表达出的mRNA
2、使用范围不同,基因组文库:开展人类基因组计划研究,构建物理图谱等
3、cDNA文库,研究某特定细胞中基因组表达状态及表达基因的功能。
二、基因组文库来源
1、基因组文库根据DNA来源又分为核基因组文库、叶绿体基因组文库及线粒体基因组文库。
2、基因组文库构建时遗传信息供体是基因组DNA,因而无发育时期及组织器官特异性,在一个完全的基因组文库中包含着基因组DNA上所有编码区及非编码区序列的克隆。
3、生物有机体的每一个基因在文库中都有其克隆,该克隆的基因片段里包括着间隔序列,所以基因组文库可真实地显示基因组的全部结构信息。
2024-11-30 广告