Question

如何使用生物素标记抗体或蛋白

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Answer 1

物素预先化通噻吩环戊酸侧链羧基与抗体、酶等物酰胺键偶联化物素制备获高敏度BAS制剂关键环节用几种：
1） 物素N—羟基丁二酰亚胺酯（biotinyl-N-hydroxy-succinnimideBNHS）制备：
取物素1g混悬于12 mlN,N-二甲基甲酰胺(DMF)加0．6g N-羟基丁二酰亚胺(HOSU)0. 8 g二环基碳二亚胺(DCC)置于密闭容器内室温磁力搅拌作用夜滤滤液经旋转蒸干加10mL乙醚洗涤继加200 ml异丙醇使其重结晶获白色粉末状晶体
BNHS酯键-C=0基团与蛋白质赖氨酸氨基结合使物素标记蛋白含赖氨酸残基越或蛋白质等电点pI 6.0其标记效越BNHS适用于标记抗体及性偏碱性抗原