Question

何谓基因组DNA文库?如何构建?

Answer 1

【答案】：分离组织或细胞染色体DNA，利用限制性核酸内切酶将染色体DNA切割成大小不同的DNA片段，其中即含有我们感兴趣的基因片段。将其与适当的克隆载体拼接成重组DNA分子，继而转入受体菌扩增，使每个细菌内都携带一种重组DNA分子的多个拷贝。在不同细菌所包含的重组DNA分子内，可能存在不同的染色体DNA片段，这样生长的全部细菌所携带的各种染色体片段就代表了整个基因组。存在于转化细菌内、由克隆载体所携带的所有基因组DNA的集合称为基因组DNA文库。基因组DNA文库涵盖了基因组全部基因信息，也包括我们感兴趣的基因。建立基因文库后，需结合适当筛选方法，选出含有某一基因的菌落，再进行扩增，将重组DNA分离、回收，获得目的基因的无性繁殖系——克隆。