核酸检测是怎样检测的
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众所周知,新型冠状病毒肺炎(COVID-19)是一种烈性呼吸道传染病,其病原体为新型冠状病毒。若想证实已出现的感染症状是由本病毒所引起,最准确的方法是从患者体内分离出活病毒,并进行病毒培养。
然而,此方法并不适合大面积应用,在此次疑似病例的确诊工作中,也并不适用。这是因为病毒培养所需时间较长,需要的场所条件也很高(P3级实验室),时效性远远跟不上临床需要。
而核酸检测作为病原学的检测手段之一,效率很高,一般情况下几个小时就可以知道结果。因此,在此次疫情中,临床上取得病原学证据的主要方式并不是病毒培养,而是核酸检测。
核酸是遗传信息载体,是对DNA(脱氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)的统称。病毒则主要由遗传物质和蛋白质组成。而新型冠状病毒正是一种RNA病毒,其遗传物质是单链RNA。核酸检测的原理,正是检测在被测者的咽拭子等样本中,是否存在病毒的RNA。如果存在,说明被病毒感染。那么,我们是否已经获悉了病毒的RNA呢?
△RNA与DNA(图片来源网络)
在武汉疫情初期,中国疾病预防控制中心应用宏基因组学技术,在短时间内完成该病毒的鉴定,并获取了全基因组序列。在病毒全基因组序列公布后,实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)试剂被快速研发。
随后,核酸检测试剂盒被应用于临床,并为确诊新冠肺炎提供病原学证据。那么,应用试剂盒进行核酸检测,究竟是怎样的一个过程呢?
首先,检测人员需要在试剂的帮助下,将样本中的核酸提取出来。再把已经分离出来的核酸加到核酸扩增试剂中,然后将其放到核酸扩增仪内,一般两个小时内就会有结果。
事实上,在操作步骤中,扩增是很重要的一环。扩增的意义在于能让微量的遗传信息成指数增加。只要样本中有核酸基因片段,就能用PCR法加以放大,从而更清晰地与病毒全基因组序列实现比对。
实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法已在临床实验室应用多年,检测体系成熟,具有特异性强、灵敏度高、检测周期短和可定量检测的优点,而且还能对病毒感染程度和治疗效果进行动态监测。
中日友好医院呼吸与危重症医学科主任医师陈欣在记者采访中介绍道:核酸检测十分敏感,只要在被检者的分泌物样本中找到一部分病毒的核酸,就可以通过RT-PCR扩增的方式,整合成序列。
"虽然不确定核酸是否来自于活病毒,但对于有呼吸道感染症状的患者或疑似患者来说,如果其咽拭子有这种核酸,一般认为来源于活病毒的一部分,间接证实其体内存在着病毒的繁殖和感染。" 陈欣告诉记者。
核酸检测容易出现"假阴性"
虽然核酸检测有灵敏度高、检测周期短等优点,但也存在着一定的弊端。不同于从人体内直接分离出活病毒的方式,核酸检测采用的是一种间接的方式,有可能造成假阴性。
因为试剂盒存在最低检测限的问题,所以只有当采到的样本中,病毒的含量达到一定程度时才能检测出来。少数情况下,可能康复者并未康复,但由于样本中病毒载量低,故康复者核酸检测的结果呈阴性,也就是我们常说的"假阴性"。
因此,在《新型冠状病毒肺炎诊疗标准(试行第七版)》中,出院标准之一为连续两次痰、鼻咽拭子等呼吸道标本核酸检测阴性(釆样时间至少间隔24小时)。
而之所以选取呼吸道标本进行核酸检测,是因为新冠肺炎属于呼吸道传染病,故而优先考虑从呼吸道的分泌物中取得标本。呼吸道又分为上呼吸道和下呼吸道,前者主要包括鼻、咽、喉;后者主要包括气管、主支气管及肺内各级支气管。
相应地,现在对疑似患者检测病毒核酸,标本的采集一般有两大类,上呼吸道标本和下呼吸道标本。
上呼吸道标本主要包括口咽拭子、鼻咽拭子(NPS)、鼻咽吸取物(NPA);下呼吸道标本主要包括痰液、气管吸取物、支气管肺泡灌洗液(BALF)等。
然而,此方法并不适合大面积应用,在此次疑似病例的确诊工作中,也并不适用。这是因为病毒培养所需时间较长,需要的场所条件也很高(P3级实验室),时效性远远跟不上临床需要。
而核酸检测作为病原学的检测手段之一,效率很高,一般情况下几个小时就可以知道结果。因此,在此次疫情中,临床上取得病原学证据的主要方式并不是病毒培养,而是核酸检测。
核酸是遗传信息载体,是对DNA(脱氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)的统称。病毒则主要由遗传物质和蛋白质组成。而新型冠状病毒正是一种RNA病毒,其遗传物质是单链RNA。核酸检测的原理,正是检测在被测者的咽拭子等样本中,是否存在病毒的RNA。如果存在,说明被病毒感染。那么,我们是否已经获悉了病毒的RNA呢?
△RNA与DNA(图片来源网络)
在武汉疫情初期,中国疾病预防控制中心应用宏基因组学技术,在短时间内完成该病毒的鉴定,并获取了全基因组序列。在病毒全基因组序列公布后,实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)试剂被快速研发。
随后,核酸检测试剂盒被应用于临床,并为确诊新冠肺炎提供病原学证据。那么,应用试剂盒进行核酸检测,究竟是怎样的一个过程呢?
首先,检测人员需要在试剂的帮助下,将样本中的核酸提取出来。再把已经分离出来的核酸加到核酸扩增试剂中,然后将其放到核酸扩增仪内,一般两个小时内就会有结果。
事实上,在操作步骤中,扩增是很重要的一环。扩增的意义在于能让微量的遗传信息成指数增加。只要样本中有核酸基因片段,就能用PCR法加以放大,从而更清晰地与病毒全基因组序列实现比对。
实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法已在临床实验室应用多年,检测体系成熟,具有特异性强、灵敏度高、检测周期短和可定量检测的优点,而且还能对病毒感染程度和治疗效果进行动态监测。
中日友好医院呼吸与危重症医学科主任医师陈欣在记者采访中介绍道:核酸检测十分敏感,只要在被检者的分泌物样本中找到一部分病毒的核酸,就可以通过RT-PCR扩增的方式,整合成序列。
"虽然不确定核酸是否来自于活病毒,但对于有呼吸道感染症状的患者或疑似患者来说,如果其咽拭子有这种核酸,一般认为来源于活病毒的一部分,间接证实其体内存在着病毒的繁殖和感染。" 陈欣告诉记者。
核酸检测容易出现"假阴性"
虽然核酸检测有灵敏度高、检测周期短等优点,但也存在着一定的弊端。不同于从人体内直接分离出活病毒的方式,核酸检测采用的是一种间接的方式,有可能造成假阴性。
因为试剂盒存在最低检测限的问题,所以只有当采到的样本中,病毒的含量达到一定程度时才能检测出来。少数情况下,可能康复者并未康复,但由于样本中病毒载量低,故康复者核酸检测的结果呈阴性,也就是我们常说的"假阴性"。
因此,在《新型冠状病毒肺炎诊疗标准(试行第七版)》中,出院标准之一为连续两次痰、鼻咽拭子等呼吸道标本核酸检测阴性(釆样时间至少间隔24小时)。
而之所以选取呼吸道标本进行核酸检测,是因为新冠肺炎属于呼吸道传染病,故而优先考虑从呼吸道的分泌物中取得标本。呼吸道又分为上呼吸道和下呼吸道,前者主要包括鼻、咽、喉;后者主要包括气管、主支气管及肺内各级支气管。
相应地,现在对疑似患者检测病毒核酸,标本的采集一般有两大类,上呼吸道标本和下呼吸道标本。
上呼吸道标本主要包括口咽拭子、鼻咽拭子(NPS)、鼻咽吸取物(NPA);下呼吸道标本主要包括痰液、气管吸取物、支气管肺泡灌洗液(BALF)等。
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核酸检测是谁让去做的?费用谁付?
据崔先生介绍说,因为刚从外地回到石家庄,出差地就发现了确诊病例,因为担心给家人和同事带来不必要的麻烦,所以他是自愿去做的核酸检测。
在前段时间国务院应对新冠肺炎疫情联防联控机制综合组引发《关于加快推进新冠病毒核酸检测的实施意见》。其中规定:类似崔先生这样的情况的属于愿检尽检范围,费用由所在单位或个人承担。所以,崔先生这次做核酸检测的费用目前暂时由个人负担,崔先生所检测的医院是石家庄长城中西医结合医院,费用是168元/次(不同的医院可能价格略有不同)。
核酸检测流程,如何预约?
石家庄目前为止已经公布了两批共计38家医院可以做核酸检测。有些医院是直接去挂号处挂号,然后给开单子就可以做了,有些医院则需要线上预约才能前去做检测。每个医院的制度是不同的,在选择医院的时候可以关注其官网、微信公众号或直接拨打医院电话进行询问。
核酸检测步骤是怎样的?多久做完?
崔先生介绍说,他做的是咽拭子的核酸检测,过程还比较简单。缴纳费用之后会给一张检测单,持单据到专门的检测室做检测就可以了。
落座后,负责检测的大夫会让受检人张开嘴,用一根棉签(长度约12-13cm),在咽喉部位进行擦拭,随后将棉签装入有密封盖的器皿内封存,并贴上受检人的名字和编号并在专门的登记册上进行登记,以防混淆。
整个检测流程很快,从前期准备到做完封存不超过1分钟,采样的时候只有非常轻微的呕吐感,并无其它不适(管子里的粉色液体是药水,并非血液)。
等待结果期间是否需要隔离?
做完核酸检测后,在等待期间是否需要隔离?崔先生说,因为他不是高风险地区回石人员,也并非发热就诊人员,所以做完核酸检测之后,可以自行居家隔离,等待结果。
核酸检测需要多久出结果?
经询问医院的医生得知,核酸检测都是做两次或以上才能保证其准确度更高。一般情况下,都是首次做完后24-48小时出结果,首次的结果出来后,即可做第二次检测。
核酸检测和血清监测有什么区别?
据广东省人民医院胸外科主任医师乔贵宾介绍,核酸检测都是采取的咽拭子检测方法,主要分为鼻咽拭子检测和口咽拭子检测。顾名思义,经鼻腔采样的为鼻咽拭子检测,经口腔取样的称为口咽拭子检测。大部分医院采用的都是口咽拭子检测,因为此种检测方法痛苦最小也更方便采集。核酸检测是直接找病毒存在的证据,就是人如果感染了病毒,在咽部的呼吸道里面会有病毒的残骸,若是经过涂抹采集出的样本里或者痰液里分离出了病毒残骸,则证明该人已经感染了病毒。
据崔先生介绍说,因为刚从外地回到石家庄,出差地就发现了确诊病例,因为担心给家人和同事带来不必要的麻烦,所以他是自愿去做的核酸检测。
在前段时间国务院应对新冠肺炎疫情联防联控机制综合组引发《关于加快推进新冠病毒核酸检测的实施意见》。其中规定:类似崔先生这样的情况的属于愿检尽检范围,费用由所在单位或个人承担。所以,崔先生这次做核酸检测的费用目前暂时由个人负担,崔先生所检测的医院是石家庄长城中西医结合医院,费用是168元/次(不同的医院可能价格略有不同)。
核酸检测流程,如何预约?
石家庄目前为止已经公布了两批共计38家医院可以做核酸检测。有些医院是直接去挂号处挂号,然后给开单子就可以做了,有些医院则需要线上预约才能前去做检测。每个医院的制度是不同的,在选择医院的时候可以关注其官网、微信公众号或直接拨打医院电话进行询问。
核酸检测步骤是怎样的?多久做完?
崔先生介绍说,他做的是咽拭子的核酸检测,过程还比较简单。缴纳费用之后会给一张检测单,持单据到专门的检测室做检测就可以了。
落座后,负责检测的大夫会让受检人张开嘴,用一根棉签(长度约12-13cm),在咽喉部位进行擦拭,随后将棉签装入有密封盖的器皿内封存,并贴上受检人的名字和编号并在专门的登记册上进行登记,以防混淆。
整个检测流程很快,从前期准备到做完封存不超过1分钟,采样的时候只有非常轻微的呕吐感,并无其它不适(管子里的粉色液体是药水,并非血液)。
等待结果期间是否需要隔离?
做完核酸检测后,在等待期间是否需要隔离?崔先生说,因为他不是高风险地区回石人员,也并非发热就诊人员,所以做完核酸检测之后,可以自行居家隔离,等待结果。
核酸检测需要多久出结果?
经询问医院的医生得知,核酸检测都是做两次或以上才能保证其准确度更高。一般情况下,都是首次做完后24-48小时出结果,首次的结果出来后,即可做第二次检测。
核酸检测和血清监测有什么区别?
据广东省人民医院胸外科主任医师乔贵宾介绍,核酸检测都是采取的咽拭子检测方法,主要分为鼻咽拭子检测和口咽拭子检测。顾名思义,经鼻腔采样的为鼻咽拭子检测,经口腔取样的称为口咽拭子检测。大部分医院采用的都是口咽拭子检测,因为此种检测方法痛苦最小也更方便采集。核酸检测是直接找病毒存在的证据,就是人如果感染了病毒,在咽部的呼吸道里面会有病毒的残骸,若是经过涂抹采集出的样本里或者痰液里分离出了病毒残骸,则证明该人已经感染了病毒。
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核酸检测的物质是病毒的核酸。核酸检测是查找患者的呼吸道标本、血液或粪便中是否存在外来入侵的病毒的核酸,来确定是否被新冠病毒感染。因此一旦检测为核酸“阳性”,即可证明患者体内有病毒存在
新冠病毒感染人体之后,首先会在呼吸道系统中进行繁殖,因此可以通过检测痰液、鼻咽拭子中的病毒核酸判断人体是否感染病毒。所以说,核酸检测阳性可以作为新型冠状病毒感染确诊的金标准
所有生物除朊病毒外都含有核酸,核酸包括脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA),新型冠状病毒是一种仅含有RNA的病毒,病毒中特异性RNA序列是区分该病毒与其它病原体的标志物。新型冠状病毒出现后,我国科学家在极短的时间里完成了对新型冠状病毒全基因组序列的解析,并通过与其它物种的基因组序列对比,发现了新型冠状病毒中的特异核酸序列。临床实验室检测过程中,如果能在患者样本中检测到新型冠状病毒的特异核酸序列,
新冠病毒感染人体之后,首先会在呼吸道系统中进行繁殖,因此可以通过检测痰液、鼻咽拭子中的病毒核酸判断人体是否感染病毒。所以说,核酸检测阳性可以作为新型冠状病毒感染确诊的金标准
所有生物除朊病毒外都含有核酸,核酸包括脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA),新型冠状病毒是一种仅含有RNA的病毒,病毒中特异性RNA序列是区分该病毒与其它病原体的标志物。新型冠状病毒出现后,我国科学家在极短的时间里完成了对新型冠状病毒全基因组序列的解析,并通过与其它物种的基因组序列对比,发现了新型冠状病毒中的特异核酸序列。临床实验室检测过程中,如果能在患者样本中检测到新型冠状病毒的特异核酸序列,
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核酸检测主要是鼻拭子或咽拭子法,经由鼻孔或口腔插入取得上呼吸道分泌物标本后送实验室检测。核酸检测主要是指目前对于新型冠状病毒肺炎的一种确诊的实验手段,核酸检测一般分为鼻拭子、咽拭子或者肺泡灌洗液以及痰液,通过呼吸道的标本,我们在实验室里可以检测2019新型冠状病毒的核酸,从而作为临床诊断的一个重要的依据。那临床上目前最常采用的检测方法是鼻拭子或者是咽拭子,操作的时候由医护人员采用特制的长柄取样的棉签,经由鼻孔或者经由口腔插入到鼻腔及咽腔中,在咽喉壁或者鼻腔的粘膜上进行涂抹,取得上呼吸道分泌物标本,这个标本取出之后再送到实验室进行相关的核酸检测。在做的过程中患者不用紧张,可能会有一些轻微的不适例如恶心,相信配合好医护人员的话,能够很快完成这个检查,不会给您带来很大的影响。
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01:07
新型冠状病毒肺炎核酸检测是采取患者的鼻咽拭子,痰和其他下呼吸道分泌物,血液,粪便等标本进行检测,新型冠状病毒核酸,若其标本核酸呈阳性,均可明确病毒感染。rt PCR 核酸检测是最常用,敏感度最高的新型冠状病毒肺炎病原学诊断标准,目前敏感度在50%以上,但部分结果呈假阳性,可能与标本取样不合格,标本RNA降解,不同提取试剂对最后提取到的核酸数量和质量有关,新型冠状病毒感染主要侵犯支气管上皮细胞和肺泡上皮细胞,应尽可能采用下呼吸道标本,如痰和气道抽取物,以更准确的反映病毒感染情况。
新型冠状病毒肺炎核酸检测是采取患者的鼻咽拭子,痰和其他下呼吸道分泌物,血液,粪便等标本进行检测,新型冠状病毒核酸,若其标本核酸呈阳性,均可明确病毒感染。rt PCR 核酸检测是最常用,敏感度最高的新型冠状病毒肺炎病原学诊断标准,目前敏感度在50%以上,但部分结果呈假阳性,可能与标本取样不合格,标本RNA降解,不同提取试剂对最后提取到的核酸数量和质量有关,新型冠状病毒感染主要侵犯支气管上皮细胞和肺泡上皮细胞,应尽可能采用下呼吸道标本,如痰和气道抽取物,以更准确的反映病毒感染情况。
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