Question

关于WESTERN BLOT的内参

我的用的一抗是TGF BATA1，分子量是25。选B ACTIN做内参，那我可以将膜剪开两半，一边做TGF BATA1，一边做B ACTIN。请问BACTIN要加入二抗吗？加什么二抗？

Answer 1

肯定要加二抗啊，内参和你的目的蛋白是一样的，也是一个蛋白，只不过表达比你的目的蛋白在各个组织之间恒定许多，它是你的目的蛋白的一个参照，但是它的作用和mark还不一样，所以内参是一定要要的，否则，人家会质疑你实验的可信性。
如果你的实验动物是大鼠，打个比方一抗是兔抗鼠吧或者其他的什么抗鼠的，二抗就是什么抗兔的，比如说羊抗兔之类，一抗最好买国外的，二抗国内的就可以了