Question

高相液相色谱法的原理，它的流动相的作用是什么

Answer 1

高效液相色谱原理大多是分配色谱，就是说样品被固定相（柱子填料）吸附以后，在流动相洗脱过程中，样品的极性不同，在流动相中溶解的浓度也不同，有的可以互溶，有的不容，有的有一定溶解度。就可以根据这个原理进行分离。

流动相的选择与注意事项1.流动相性质（1）液相色谱的流动相根据作用可分为底剂和洗脱剂。底剂决定基本的色谱分离情况，洗脱剂对某几个组分选择分离。流动相组成改变，极性改变，可显著改变组分分离状况；（2）亲水性固定液常采用疏水性流动相，即流动相的极性小于固定相的极性，称为正相液液色谱法，极性柱也称正相柱。正相柱的底剂用低极性溶剂，洗脱剂则选用极性较强的针对性溶剂。（3）若流动相的极性大于固定液的极性，则称为反相液液色谱，非极性柱也称为反相柱。组分在两种类型分离柱上的出峰顺序相反。反相柱通常以水为流动相的主体，再加入不同配比的有机溶剂做调节剂。

Answer 2

高效液相色谱原理大多是分配色谱，就是说样品被固定相（柱子填料）吸附以后，在流动相洗脱过程中，样品的极性不同，在流动相中溶解的浓度也不同，有的可以互溶，有的不容，有的有一定溶解度。就可以根据这个原理进行分离。

Answer 3

原理简单来说就是利用流动相带动样品在柱子的固定相的不断吸附和解析，由于不同的物质与固定相的吸附解析能力不同，从而达到把样品分离的作用！
流动相主要起到运载样品的作用，同时他和固定相的的作用也起到分离的作用

Answer 4

不同的样品洗脱体积是不同的，以保留时间计算，大概在7min-15min出峰为宜，当然这是对单一样品来说的，如果目标峰或干扰峰较多，则首先要考虑的是分离度。这样计算的话（1ml/min的流速），一个样品大概需要10-20ml的流动相，另外色谱柱的平衡也需要消耗流动相。