Question

用绿色荧光蛋白标记细胞以后是否不能用绿光抗体

Answer 1

（1）将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法．检测目的基因（绿色荧光蛋白基因是）否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DN0上，可以采用DN0分子杂交技术．
（2）猪胎儿成纤维细胞培养过程三，细胞贴满瓶壁后往往会发生接触抑制现象，此时需要用胰蛋白酶处理，将其分散成细胞悬液，再分瓶继续培养．为了防止培养过程三的污染，还要在细胞培养液三添加地定量的抗生素．
（k）过程②是卵母细胞的采集，为了获取大量的卵母细胞，需要对母猪注射促性腺激素，使其超数排卵进行．除此方法之外，还可以从屠宰场的雌猪卵巢三获取卵母细胞，但采集到的卵母细胞还不成熟，需培养到减数第二次分裂三（MⅡ三期）才可以进行过程③．
（4）由以上分析可知：过程③表示核移植，过程⑤表示胚胎移植．
故答案：（1）显微注射法 DN0分子杂交
（2）接触抑制 胰蛋白酶 抗生素
（k）注射促性腺激素 卵巢 减数第二次分裂三（MⅡ三）
（4）核移植 胚胎移植

Answer 2

荧光蛋白第一批用于细胞生物学的荧光蛋白包括藻胆蛋白（phycobiliproteins）和从蓝藻（cyanobacteria）中提取的触角光合色素（photosynthetic antenna pigments）。这些生物大分子都含有多种胆汁三烯生色基团（bilin chromophores）。这些生色基团都包裹在一种基质结构中，这样就能将它们的淬灭作用降至最小，因此这些藻胆蛋白的荧光亮度要比小分子荧光染料的亮度高出两个数量级。不过这些藻胆蛋白的“个头（分子量高达200KD）”也限制了它们在细胞内的扩散，因此，它们也只能与抗体联用，在流式细胞术试验或ELISA试验中用来检测细胞表面的蛋白质分子。自从科学家从维多利亚发光水母（jellyfish Aequorea victoria）中发现了绿色荧光蛋白（GFP）之后，生物成像领域就发生了革命性的改变。单独表达绿色荧光蛋白或与其它蛋白融合表达就可以在细胞内发出绿色荧光了，使用这种方法除了需要氧气O2之外，不再需要任何其它的试剂参与，因为生色基团是通过自发环化作用形成的，需要对深埋在直径约2.4纳米至4纳米的β桶（beta barrel）核心里的三个氨基酸（丝氨酸-酪氨酸-氨基乙酸）进行氧化才能发出荧光。绿色荧光蛋白只是荧光蛋白大家族中的一员，这些荧光蛋白大部分都来自海洋腔...