Question

引物是做什么用的？

Answer 1

引物的意义在于提供3’-OH，用于子链延伸，只要保证引物的3’-OH及该末端一段序列可以和模板链碱基互补配对，子链延伸便可以完成；

一般情况下，子链延伸中，只要时间足够、原料充足，最终会延伸至模板链的末端，子链延伸不会中途停止（当目的片段较大时可能会造成不能完整扩增）；

PCR的最终产物，虽然有大小不同的片段存在，但完整目的基因占绝对优势，可通过电泳后分离获得。

基因工程中，选用两种不同的限制性核酸内切酶（限制酶）分别对目的基因和载体进行处理，使得二者末端分别带上不同的粘性末端，该过程的目的，一来是为了避免目的基因和载体的自身环化，二来是保证目的基因与载体连接方向的正确性（目的基因的定向连接）。