什么是引物?有哪些类型?

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生活小学问686
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2023-04-26 · 生活其实很简单,把自己照顾好,重要待好
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正向引物,反向引物。

引物自身及引物之间不应存在互补序列。连续互补的碱基应该要少于4 个。引物应使其G值不要太高,G值越大,则双链越稳定。

引物长度和GC 含量要适中。引物长度大概为18~28 bp,但不应大于38 bp,引物过短会影响到扩增的特异性,太长的话其延伸温度将会大于74 ℃,不利Taq 酶的催化反应。若扩增产物为4~5 kb,引物最好不要少于24bp。

扩展资料:

注意事项:

1、引物的长度一般为15-30 bp,常用的是18-27 (22)bp,但不应大于38,因为过长会导致其延伸温度大于74℃,不适于Taq DNA聚合酶进行反应。 

2、碱基要随机分布:引物序列在模板内应当没有相似性较高,尤其是3’端相似性较高的序列,否则容易导致错误引发(False priming)。降低引物与模板相似性的一种方法是,引物中四种碱基的分布最好是随机的,不要有聚嘌呤或聚嘧啶的存在。

3、3′端不应超过3个连续的G或C,如GGG或CCC,因这样会使引物在GC富集序列区错误引发。

4、引物3’端的末位碱基对Taq酶的DNA合成效率有较大的影响。不同的末位碱基在错配位置导致不同的扩增效率,末位碱基为A的错配效率明显高于其他3个碱基,因此应当避免在引物的3’端使用碱基A。

参考资料来源:百度百科-引物设计

参考资料来源:百度百科-正向引物

参考资料来源:百度百科-反向引物

上海宇玫博生物科技有限公司
2018-10-30 广告
exosome的提取方法有:一、超速离心法,这是目前外泌体提取常用的方法 。此种方法得到的外泌体量多,但是纯度不足,电镜鉴定时发现外泌体聚集成块, 由于微泡和外泌体没有非常统一的鉴定标准,也有一些研究认为此种 方法得到的是微泡不是外泌体 。... 点击进入详情页
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擎科生物
2023-05-31 · 生物科技让世界更美好
擎科生物
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在分子生物学中,引物(primer)是一种短的DNA或RNA片段,它们在聚合酶链反应(PCR)或逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等核酸扩增技术中起到引发DNA或RNA合成的作用。
引物通常由合成的寡核苷酸链组成,其长度一般在18到30个碱基对之间。它们是根据目标序列的互补性设计的,以确保引物与目标序列的特定区域进行互补配对。
根据其在PCR或RT-PCR反应中的作用和位置,引物可以分为以下几种类型:正向引物、 反向引物、通用引物、修饰引物、 突变引物等等
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