Question

试论述微生物育种的方法。

Answer 1

【答案】：(1)诱变育种：利用各种诱变剂处理微生物细胞，提高基因的随机突变频率，通过一定的筛选方法获得所需要的高产优质菌株。
一般采用物理或化学诱变剂处理菌株或孢子悬液，然后涂布培养，挑单菌落进行测定。筛选的策略很多，例如，营养缺陷型、抗阻遏和抗反馈突变型、抗性突变型等。
(2)体内基因重组育种：采用接合、转化、转导和原生质体融合等遗传方法和技术使微生物细胞内发生基因重组，以增加优良性状的组合，或者导致多倍体的出现，从而获得优良菌株的一种育种方法。
原生质体融合：原生质体的制备、原生质体融合和再生、融合子的选择。
杂交育种：
准性生殖：
(3)DNA Shuffling技术(体外同源重组技术)：用DNAase Ⅰ消化功能相同的一组基因片段(A) ，从而产生随机小片段(B) ，经提纯后，用无引物的类似PCR反应重新装配这些小片段成完整的重组基因片段(C) ，在装记过程中被证明有低水平点突变发生，克隆并选择正突变体(D) ，并将正突变体的重组基因片段作新一轮的体外重组。