胰岛素的方法有哪些怎样用基因工程的
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1.获得人的胰岛素基因
使用内切酶将目的基因从原DNA中分离从DNA中提取胰岛素基因,获得人的胰岛素基因。
2.提取质粒
使用细胞工程培养大肠杆菌,从大肠杆菌的细胞质中提取质粒。
3。将目的基因导入质粒经行基因重组
使用内切酶(与目的基因有相同粘性末端的内切酶)将质粒切开,再使用DNA连接酶将目的基因与质粒"缝合",形成一个能表达出胰岛素的基因的重组质粒。
4。将重组质粒导入到受体细胞中
杆菌的培养液中加入含有Ca+的物质,如CaCl2.这使细胞变成感受态细胞.这样的细胞会吸收外源基因.此时将重组的质粒也放入培养液中,大肠杆菌便会将重组质粒吸收。
5。目的基因在受体细胞中表达
在大肠杆菌内,质粒通过表达转录与翻译后,通过大肠杆菌的大量繁衍,便可大量生产出胰岛素。
使用内切酶将目的基因从原DNA中分离从DNA中提取胰岛素基因,获得人的胰岛素基因。
2.提取质粒
使用细胞工程培养大肠杆菌,从大肠杆菌的细胞质中提取质粒。
3。将目的基因导入质粒经行基因重组
使用内切酶(与目的基因有相同粘性末端的内切酶)将质粒切开,再使用DNA连接酶将目的基因与质粒"缝合",形成一个能表达出胰岛素的基因的重组质粒。
4。将重组质粒导入到受体细胞中
杆菌的培养液中加入含有Ca+的物质,如CaCl2.这使细胞变成感受态细胞.这样的细胞会吸收外源基因.此时将重组的质粒也放入培养液中,大肠杆菌便会将重组质粒吸收。
5。目的基因在受体细胞中表达
在大肠杆菌内,质粒通过表达转录与翻译后,通过大肠杆菌的大量繁衍,便可大量生产出胰岛素。
知禾
2024-08-13 广告
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