简述RNA提取方法及其注意事项。
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由于RNAase的影响,为获得完整的基因RNA分子,必须在总RNA分离纯化的最初阶段,尽可能地灭活胞内RNAase的活性,因RNAase非常稳定,可降解标本中的RNA,许多组织和细胞中都含有活性很高的RNAase,因此在纯化RNA的过程中要保证无RNAase污染。选择性地使用针对RNAase的蛋白质变性剂、蛋白水解酶和能与蛋白质结合的阴离子去污剂,并联合使用RNAase的特异性抑制剂能极大地防止内源性RNAase对RNA的水解。提取RNA的方法有硫氰酸胍分离法等。
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