mtt实验法注意事项
加药是隔12小时好,还是24小时好,倒去MTT时是不是不要太用力,最近做这个实验老是失败,请教做过的朋友有没什么特别要注意的地方,关键的步骤等,谢谢!...
加药是隔12小时好,还是24小时好,倒去MTT时是不是不要太用力,最近做这个实验老是失败,请教做过的朋友有没什么特别要注意的地方,关键的步骤等,谢谢!
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加药时间主要看你的实验目的、细胞的生长速度以及你的铺板密度。
MTT最好还是吸出来,因为倒的力度太小,溶液倒不干净;力度太大又可能把结晶也倒掉了。如果用枪头吸取,可以倾斜30度慢慢地吸,一定不要把结晶吸出来,也可以用注射器吸取。总的原则就是既要把MTT溶液吸干净,又不能让结晶有所损失,否则都将影响最后的OD值。
MTT最好还是吸出来,因为倒的力度太小,溶液倒不干净;力度太大又可能把结晶也倒掉了。如果用枪头吸取,可以倾斜30度慢慢地吸,一定不要把结晶吸出来,也可以用注射器吸取。总的原则就是既要把MTT溶液吸干净,又不能让结晶有所损失,否则都将影响最后的OD值。
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加药间隔可以查查相关的文献 或是多做几个梯度
去MTT:(因为MTT会形成结晶且易分离,所以拿96孔板是要轻)(所以绝对不可以太用力)
可以用枪头慢慢吸,比如将96孔板倾斜30度,沿着孔壁慢慢洗掉MTT(不要反复倾斜96孔板,那样也容易吸掉结晶的) 个人觉得倒MTT力度太大,暂时没用过
祝你实验成功
去MTT:(因为MTT会形成结晶且易分离,所以拿96孔板是要轻)(所以绝对不可以太用力)
可以用枪头慢慢吸,比如将96孔板倾斜30度,沿着孔壁慢慢洗掉MTT(不要反复倾斜96孔板,那样也容易吸掉结晶的) 个人觉得倒MTT力度太大,暂时没用过
祝你实验成功
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可以根据细胞贴壁情况的不同来决定怎样丢弃MTT,个人觉得如果细胞贴壁牢固的话是可以直接丢弃MTT的,不需要用枪来吸
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