关于基因工程检测目的基因是否插入转基因生物的问题
教科书上说这要用DNA杂交技术,但是我觉得可以不需要。如果直接用放射性物质培养含有目的基因的供体细胞,如此提取出的目的基因具有放射性,目的基因导入受体后就直接检测放射性就...
教科书上说这要用DNA杂交技术,但是我觉得可以不需要。如果直接用放射性物质培养含有目的基因的供体细胞,如此提取出的目的基因具有放射性,目的基因导入受体后就直接检测放射性就可以了。而且如果这样做,运载体上也就不需要标记基因了,检测转基因生物时就不用进行DNA杂交了。
我想知道这个做法是否可行,以及是否有建设性
是这样的,细胞分裂时要复制DNA,那么他的后代基因就具有了放射性,我是这样认为的。
我问过老师了,他说放射性元素对生命体影响不大,比如说C14吧,人体里就有不少。而且老师说受体细胞产生蛋白质需要一段时间,先检验基因可以看是否免除以后的检验步骤如mRNA、蛋白质检测。
先不讨论基因工程整个过程,我只是想知道在检测的这一阶段我的想法是否可行。我又看了书,发现目的基因还可以先从基因文库中获取(或者选择从供体细胞里获取,反正得到目的基因或其序列信息),再用PCR仪或DNA合成仪合成,此时可以用带荧光标记的或放射性的原料合成,然后按照我上面所说的做下去。
我想知道这样改正方法之后还可行吗? 展开
我想知道这个做法是否可行,以及是否有建设性
是这样的,细胞分裂时要复制DNA,那么他的后代基因就具有了放射性,我是这样认为的。
我问过老师了,他说放射性元素对生命体影响不大,比如说C14吧,人体里就有不少。而且老师说受体细胞产生蛋白质需要一段时间,先检验基因可以看是否免除以后的检验步骤如mRNA、蛋白质检测。
先不讨论基因工程整个过程,我只是想知道在检测的这一阶段我的想法是否可行。我又看了书,发现目的基因还可以先从基因文库中获取(或者选择从供体细胞里获取,反正得到目的基因或其序列信息),再用PCR仪或DNA合成仪合成,此时可以用带荧光标记的或放射性的原料合成,然后按照我上面所说的做下去。
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5个回答
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不可行。你的想法太简单,当然和你没有实际经验有关。
首先,你加的放射性物质是什么呢?[32P]的无机盐吧,如此标记DNA,整个基因组都被标记,不只是目的基因。你怎么获得纯化的标记的目的基因呢?
2、目的基因导入受体,说起来简单。但实际的过程并不是我们宏观上放取物品那么简单。先把整个过程考虑完你再考虑你的方案是否成立。
3、引入放射性同位素,以后的所有过程都涉及安全问题
4、教科书的方案很原始,而且转基因检测的通常不是DNA,而是其表达的蛋白,用的是western。如果检测整合的话,一般用PCR而不是southern。
首先,你加的放射性物质是什么呢?[32P]的无机盐吧,如此标记DNA,整个基因组都被标记,不只是目的基因。你怎么获得纯化的标记的目的基因呢?
2、目的基因导入受体,说起来简单。但实际的过程并不是我们宏观上放取物品那么简单。先把整个过程考虑完你再考虑你的方案是否成立。
3、引入放射性同位素,以后的所有过程都涉及安全问题
4、教科书的方案很原始,而且转基因检测的通常不是DNA,而是其表达的蛋白,用的是western。如果检测整合的话,一般用PCR而不是southern。
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您好,希望我的回答对你有帮助!
我觉得你的误区在这里“如果直接用放射性物质培养含有目的基因的供体细胞,如此提取出的目的基因具有放射性”
这么会呢,假如你吃的饭带放射性,那么你的基因也会有放射性???
培养是不会改变基因型的!
你是弄混了噬菌体侵蚀带目地基因的大肠杆菌,和这不同,噬菌体是在大肠杆菌体内用有放射性的单体合成新的基因,所以那样培养会有放射性的新噬菌体。
祝学习进步!想法很棒!
我还真没这么想过,不过可能行,至于书上那么说,可能实践上也有不妥之处
谢谢你啊,让我开扩眼界
我觉得你的误区在这里“如果直接用放射性物质培养含有目的基因的供体细胞,如此提取出的目的基因具有放射性”
这么会呢,假如你吃的饭带放射性,那么你的基因也会有放射性???
培养是不会改变基因型的!
你是弄混了噬菌体侵蚀带目地基因的大肠杆菌,和这不同,噬菌体是在大肠杆菌体内用有放射性的单体合成新的基因,所以那样培养会有放射性的新噬菌体。
祝学习进步!想法很棒!
我还真没这么想过,不过可能行,至于书上那么说,可能实践上也有不妥之处
谢谢你啊,让我开扩眼界
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2011-02-12
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可行性不大。首先放射性物质对生物体有害,如果将带有放射性元素的目的基因转入生物体中,对一系列指标的检测有一定影响。而且操作过程比DNA杂交麻烦。采用杂交技术,只要将序列正确的目的基因载体转入生物体中,采取DNA原位杂交就可以检测
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但你必须要在培养基中加入放射性元素
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放射会瓦解DNA的,很容易变异的
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