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1. 胚胎干细胞(为方便, 下简称ES) 定向分化研究的经典途径是: 扩增ES后, 撤去LIF, 继续悬浮或悬滴培养2--5天, 形成拟胚体(E B ), 然后用不同的措施定向诱导分化为目的细胞. 之所以经EB途径, 目的是模拟体内胚胎发育过程, EB中内中外三胚层的细胞互相支持, 互相提供分化生长的微环境. 近3年来, 陆续有文章报道不经EB途径, 直接诱导ES分化亦可获得目的细胞, 同时指出EB的空间立体结构使分化所得细胞含有大量不同分化时期细胞, 有悖高效性原则. 但目前主流还是使用经典途径, 包括06年在Nat.发表的几篇有关ES定向分化文章.
2. 经EB途径得到的细胞"短命"原因, 与细胞接触抑制有关, 也与因空间受限不能良好的吸收培养基营养有关.
3. 目前ES定向分化研究极不成熟, 程序性添加诱导因子的依据是, 在胚胎中这些因子是程序性表达的, 如向肝脏分化先表达FGF,然后表达HGF, 体外实验就先添加FGF,然后添加HGF, 其目的是模拟体内胚胎发育过程.
2. 经EB途径得到的细胞"短命"原因, 与细胞接触抑制有关, 也与因空间受限不能良好的吸收培养基营养有关.
3. 目前ES定向分化研究极不成熟, 程序性添加诱导因子的依据是, 在胚胎中这些因子是程序性表达的, 如向肝脏分化先表达FGF,然后表达HGF, 体外实验就先添加FGF,然后添加HGF, 其目的是模拟体内胚胎发育过程.
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