Question

非洲猪瘟检测报告哪些地方容易出错

Answer 1

问：非洲猪瘟检测报告哪些地方容易出错

答：亲亲您好哦，让您久等了哦，很高兴能为您服务哦～(一)样品保存或运输不当，导致样品DNA降解为避免此类情况，建议做好以下两点:1.采样后尽快进行检测或运输，如需要长时间运输可在样品中加DNA保存液，并加入干冰运输(对比数据详见表1、表2)。2.实验室检测时，也应尽快进行，如当天检测不完，可先提取DNA，将DNA进行冻存后，次日进行检测。(二)检测方法不敏感，造成假阴性检测结果普通PCR或试纸条检测方法的灵敏度较差，易产生假阴性结果，不利于非瘟病毒的早诊断、早发现、早处置。建议选择敏感度高、重复性好的荧光定量PCR检测试剂盒，或实验室自行建立和优化荧光定量PCR方法，保证检测方法的灵敏度和特异性。(三)实验室局部气溶胶污染，产生假阳性检测结果实验室检测的污染主要由样品采集不当、样品间交叉污染及PCR体系中的试剂耗材污染等三方面所引起。为避免此类情况，建议做好以下四点:，1.样品检测时，样品的处理、DNA的提取及PCR反应等实行分区操作，并且每个区域内的物品专用，做到人流、物流单向流动。2.定期使用紫外线、臭氧、DNA裂解液等对生物安全柜、超净台、离心机及实验室进行消毒;合理通风也是避免污染的有效措施。同时对实验室环境进行监控。3.整个PCR体系是一个时间长且繁杂的过程，在进行检测时要设置无模板、阴性样品、阳性样品和环境样品等对照，最好设立内对照，通过这四个方面对整个检测过程进行监控，保证结果的准确性。4.在保证扩增效率的前提下，把PCR反应体系中的胸腺嘧啶(dTTP)替换为尿嘧啶(dTTP)，从而使PCR产物中含有大量尿嘧啶，下次PCR反应前加入尿嘧啶糖苷酶(UNG)降解产物，可消除 PCR产物的残留污染。