Question

用基因工程生产干扰素的具体过程

我得写一篇论文，要越长越好，应该怎么具体化呢，而且要正确啊

Answer 1

1. 设计合成干扰素基因的两端引物（完全的），每条引物内或5'-端最好有内切酶酶切位点。
2. 有药物诱导细胞，如佛波酯，使细胞表达干扰素升高。
3. 破碎细胞，提取细胞总mRNA.
4. 用逆转录试剂盒逆转录，把总mRNA逆转录成cDNA
5. 以cDNA为模板、干扰素引物为引物，PCR，得到完全的干扰素基因的PCR产物
6. 提取载体（质粒、病毒等），双酶切，再把干扰素基因的PCR产物用相应的酶酶切，用连接酶连接
7.连接完成后分离纯化，测序，与原干扰素序列比对。
8.鉴定序列无误后（无义突变也行），导入受体细胞，筛选
9.筛选出来后，提取重组产生的干扰素，活性测定
10.有活性再扩大规模培养，提取生产

你不做干脆请写手帮着写得了！几千就解决问题

Answer 2

培养菌种的单细胞，利用基因重组将质粒（质粒中有调控合成干扰素的基因）导入受体细胞，然后初培养，再进行选择行培养即可
1. 设计合成干扰素基因的两端引物（完全的），每条引物内或5'-端最好有内切酶酶切位点。
2. 有药物诱导细胞，如佛波酯，使细胞表达干扰素升高。
3. 破碎细胞，提取细胞总mRNA.
4. 用逆转录试剂盒逆转录，把总mRNA逆转录成cDNA
5. 以cDNA为模板、干扰素引物为引物，PCR，得到完全的干扰素基因的PCR产物
6. 提取载体（质粒、病毒等），双酶切，再把干扰素基因的PCR产物用相应的酶酶切，用连接酶连接
7.连接完成后分离纯化，测序，与原干扰素序列比对。
8.鉴定序列无误后（无义突变也行），导入受体细胞，筛选
9.筛选出来后，提取重组产生的干扰素，活性测定
10.有活性再扩大规模培养，提取生产

Answer 3

培养菌种的单细胞，利用基因重组将质粒（质粒中有调控合成干扰素的基因）导入受体细胞，然后初培养，再进行选择行培养即可。其实过程挺复杂，你再查查别的资料吧。