Question

启动子和终止子之间加入一个目的基因，引起的插入突变一定会导致基因不能表达吗？为什么，恭请举例说明

.拥有标记基因是为了方便质粒进入宿主细胞后容易被检测出来，以便检测目的基因是否导入受体。下面说说 载体所需的序列结构目的基因就是能够产生所需蛋白质的DNA片段，比如抗虫棉就是植入能产生抗虫蛋白的目的基因 。 启动子、终止子：启动子、终止子是目的基因DNA上特殊排序的碱基。RNA从启动子开始转录、翻译，到终止子结束。整个过程完成后便产生所需蛋白质。

Answer 1

这句话是错的。
补充一下楼上说的
1.启动子和终止子之间加入几个碱基：如果碱基加在CDS（编码蛋白区）的两端，或者内含子中，根本不影响蛋白编码。即使在CDS，加入的碱基为3的倍数，不影响编码框，也不会对蛋白造成大的影响。
2.启动子和终止子之间加入一个片段：也无所谓，如果加在UTR区（就是CDS两端），或者内含子区，或者加入的片段是3的倍数，结果参照上一条。
3.启动子和终止子之间加入一个目的基因：载体构建中，就是将目的基因插入启动子和终止子之间，使得基因表达。
4.启动子和终止子之间加入一个外源基因：在启动子和终止子之间本身有基因的情况下，再加入外源基因，也是可以表达的，不过要看启动子的强弱，强启动子可以启动多个基因，弱启动子可能会不行。不过两个基因融合表达是常见的事儿。
5.启动子与目的基因之间加入一个片段，可能会导致基因无法启动，启动子与目的基因之间的片段长短会影响到启动子的启动效果。商业化的载体上，都是将启动子与多克隆位点之间调到了较好的位置。
6.启动子和终止子之间加入一个目的基因而引起基因无法表达的原因有很多，最主要的几个你参照以上5条反过来看就是。

追问

第三条的基因表达载体的构建中，目的基因本身不携带启动子和终止子吗？？？如果携带，那还插入什么！！！

追答

一般的将基因克隆到载体上，仅仅是基因，不携带启动子，终止子可带可不带

Answer 2

“加入一个目的基因”改为“加入一个目的片段”后，我再回答此问题。

不一定。如在终止子前加一个或多个三联密码子。大肠杆菌的pET系列质粒中，这种加入His-Tag的事情是经常的，也不影响目的基因的表达。