Question

elisa 法检测HIV为什么总是出现假阳性

Answer 1

造成ELISA检测HIV假阳性的原因主要有3个:
1.试剂影响因素,可能与试剂盒包被抗原组合不同有关。目前第3代双抗原夹心法试剂的质量优于第2代间接法试剂，具有更好的敏感性和特异性，尤其对感染早期的弱阳性标本,主要包被的抗原的种类及比例，纯度有关系。
2.患者自身情况的影响， 患者体内特有的内源件物质可造成假阳性结果，尤其是类风湿因子存在于类风湿关节炎及某些自身免疫性疾病患者血液中，其有与变性的IgG非特异性结合的性质，会与固相反应板上的IgG及酶标记IgG结合造成假阳性。
3.检测过程中影响因素，如标本溶血，洗涤不彻底，温浴时间和温度不够等都会造成检测假阳性。
鉴于ELISA假阳性比较多，所以只能作为初筛，阳性必须送疾控中性做确证实验。

追问

我想请问的是作为初筛实验，一般第一批不会出现假阳性，而老是在最后一批出现假阳性，请问这是为什么呢？

追答

这种现象有两种情况，一是温度的边缘效应，温浴时最好封板，第二种情况就是洗板机洗板时污染。
试剂盒开封后用不完的空条及时封存。酶免的影响因素很多，由于没有在现场查看所以不一定就能帮你找出原因，只要严格按照说明进行加样，洗板，温浴，正确加显色剂和终止剂就行了，酶标仪比色时注意边缘的孔，有时酶标仪的板托会影响边缘的孔的吸光度的。