进行植物组织培养一般要经历哪几个阶段?

 我来答

1个回答

#热议# 普通体检能查出癌症吗？

清宁时光17
2022-10-12 · TA获得超过1.4万个赞

知道大有可为答主

回答量：6676

采纳率：100%

帮助的人：36.7万

我也去答题访问个人页

关注

展开全部

进行植物组织培养一般要经历哪几个阶段?

一个完整的植物组织培养过程一般包括以下几个步骤：
（1）准备阶段
查阅相关文献，根据已成功培养的相近植物资料，结合实际制订出切实可行的培养方案。然后根据实验方案配制适当的化学消毒剂以及不同培养阶段所需的培养基，并经高压灭菌或过滤除菌后备用。
（2）外植体选择与消毒
选择合适的部位作为外植体，采回后经过适当的预处理，然后进行消毒处理。将消毒后的外植体在无菌条件下切割成一定大小的小块，或剥离出茎尖，挑出花药，接种到初代培养基上。
（3）初代培养
接种后的材料置于培养室或光照培养箱中培养，促使外植体中已分化的细胞脱分化形成愈伤组织，或顶芽、腋芽直接萌发形成芽。然后将愈伤组织转移到分化培养基分化成不同的器官原基或形成胚状体，最后发育形成再生植株。
（4）继代培养
分化形成的芽、原球茎数量有限，采用适当的继代培养基经多次切割转接。当芽苗繁殖到一定数量后，再将一部分用于壮苗生根，另一部分储存或继续扩繁。进行脱毒苗培养的需提前进行病毒检测。
（5）生根培养
刚形成的芽苗往往比较弱小，多数无根，此时可降低细胞分裂素浓度或不加，提高生长素浓度，促进小苗生根，提高其健壮度。
（6）炼苗移栽
选择生长健壮的生根苗进行室外炼苗，待苗适应外部环境后，再移栽到疏松透气的基质中，注意保温、保溼、遮荫，防止病虫危害。当组培苗完全成活并生长一定大小后，即可移向大田用于生产。
如：茎尖→表面消毒→接种诱导培养基→茎尖生长→病毒检测鉴定→培养无根小植株→培养生根→完整小植株→炼苗20-25天→移栽成活。
对不同的品种词流程会略有差异，如进行果树育苗还需进行嫁接等操作流程，但对组培工厂化育苗而言，一般可根据上面的流程图来安排各项作业，只有相互衔接好、配合好，才能提高生产效益。

植物组织培养过程中，植物细胞要经历两个重要阶段是什么

依据原理：细胞的全能性。
离体的植物器官、组织或细胞，在培养了一段时间后，会通过细胞分裂，形成愈伤组织。由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化，或者叫做去分化。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植物体。

植物组织培养一般的的流程

植物组织培养实验基本步骤
一、母液的配置
1、MS大量元素母液的配制
一般将大量元素配制成10倍的母液，使用时再稀释10倍。按照配方表中用量依次分别称取扩大10倍的：NH4NO3 、KNO3 ,KH2PO4 、MgSO4.7H2O 、CaCl2.2H2O的量，所有药品称取完毕后用蒸馏水逐个溶解，待全部溶解后，最后定容至1000ml，转入1000ml细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中储存备用。
2、MS微量元素母液的配制
一般将微量元素配制成100倍的母液，使用时再稀释100倍。按照配方表中用量分别依次称取：MnSO4 •4H2O、ZnSO4•7H2O 、H2BO3 、NaMoO4•2H2O、 CuSO4•5H2O、 CoCl2•6H2O扩大100倍的量，用蒸馏水逐个溶解，待全部溶解后，用容量瓶定容至1000ml，转入1000ml细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中储存备用。
3、MS铁盐母液配制
一般将铁盐配制成100倍的母液，使用时再稀释100倍。按照配方表中用量分别称取扩大100倍的：FeSO4•7H2O和Na2•EDTA•2H2O的量，把FeSO4•7H2O和 Na2•EDTA•2H2O分别置于200ml蒸馏水中，加热并不断搅拌使之溶解（磁力搅拌器，边加热，边搅拌）。保持加热，把FeSO4溶液慢慢倒入Na2•EDTA溶液中并不断搅拌，接近沸腾时停止加热，待溶液冷却后加蒸馏水到最终容积1000ml，置于棕色细口瓶中，用力振荡1～2min，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名。在室温下避光储存一段时间令其充分反应后，再置于4℃冰箱中储存备用。
4、MS有机化合物母液的配制
一般将有机化合物配制成100倍的母液，使用时再稀释100倍。按照配方表中用量分别称取扩大100倍的：肌醇、维生素B1、烟酸、甘氨酸、维生素B6的量，用蒸馏水依次溶解并定容至500ml后，转入500ml细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中储存备用。
二、植物激素的配置
常见激素：二氯苯氧乙酸（2，4－D）、萘乙酸（NAA）、吲哚乙酸（IAA）、吲哚－3－丁酸（IBA）、激动素（6-糠氨基嘌呤、 KT）、6－苄氨基嘌呤（6－BA）、赤霉素（GA3）、
1、生长素类：
（1）、生长素类在组织培养中的主要作用是：诱导细胞的分裂和根的分化，诱导愈伤组织
（2）、常见生长素：二氯苯氧乙酸（2，4－D）、萘乙酸（NAA）、吲哚乙酸（IAA）、吲哚－3－丁酸（IBA）。NAA、IAA、IBA被广泛用于生根，2，4－D有利于愈伤组织的诱导和生长。IAA容易光解，注意用棕色试剂瓶储存，储存时间不要太久。
（3）、溶解方法：用少量1mol/L NaOH或95％酒精预溶解，再加蒸馏水定容，以前者为好。
（4）、储存：配成一定浓度后，冰箱冷藏储存
2、细胞分裂素
组织培养中，细胞分类素主要促进细胞分裂和由愈伤组织上或器官上分化不定芽。细胞分裂素常常与生长素相互配合，用以调节细胞分裂，细胞伸长，细胞分化和器官形成。
（1）、常用的细胞分裂素有： 6－苄氨基嘌呤（6－BA）、激动素（6-糠氨基嘌呤、 KT）、玉米素（ZT）、噻二唑苯基脲（ thidiazuron、 TDZ ）
（2）、溶解方法：用少量（1ml）1mol/L HCL预溶解，再加蒸馏水定容。
（3）、储存：配成一定浓度后，冰箱冷藏储存
3、赤霉素（GA3）
（1）、溶解方法：用少量95％酒精预溶解，再加蒸馏水定容。
（2）、储存：配成一定浓度后，冰箱冷藏储存
（3）、赤霉素易溶于水，但溶于水后不稳定，容易分解
（4）、灭菌：高温易分解，要过滤灭菌
4、脱落酸
（1）、溶解：易溶于NaHCO3溶液、氯仿或丙酮。
（2）、储存：具有热稳定性，但容易发生光解。配成一定浓度后，冰箱冷藏储存
三、培养基的制备与灭菌
（一）、培养基的制备
1、将所需的各种母液和植物激素按顺序放好，将洁净的各种玻璃器皿等放在指定位置。
2、取烧杯一个内盛200ml蒸馏水，按照培养基配方所需量依次取母液和植物激素加入烧杯，搅拌，按相应培养基称量蔗糖和琼脂，并新增到烧杯中，在电炉上加热待琼脂完全融化后加蒸馏水定容至所需体积。
3、充分混合后，用1mol/LNaOH和1mol/LHCl调节培养基的pH为培养基要求pH值。
4、趁热把培养基分装到广口瓶中。封好瓶口。待灭菌。
（二）、培养基的灭菌
灭菌温度及灭菌时间：121℃（1.06kg/cm2）下灭菌20分钟。（如是实验所用菌材灭菌，如无菌水及器械，则是121℃（1.06kg/cm2）下灭菌30分钟）
1、检查灭菌锅外层锅内水位，水量过少时应加水。把分装好的培养基放入灭菌锅的消毒桶内。
2、盖上锅盖，注意按照说明操作并确定已盖好，设定好温度和时间引数，开启电源加热灭菌。
3、灭菌时间到后，先切断电源，让灭菌锅内温度自然下降，待灭菌锅压力表指标降到0时，开启排气阀，旋松螺栓，开启锅盖，取出已灭菌的培养基。
4、刚灭过菌的培养基成液体状，取出时不要用力摇动，否则会导致部分培养基沾附在瓶壁。放置在水平桌面上自然冷却。在室温下放置1-2天，观察有无微生物生长，以确定培养基是否彻底灭菌。经检查没有杂菌生长的方可使用。
四、无菌操作技术和接种
1、接种前，用75%酒精棉球擦拭超净工作台台面，将培养基及接种用具放入超净工作台台面，开启超净工作台紫外灯及接种房间紫外灯，照射约30min，然后关闭紫外灯。开启房间换气扇及微开超净工作台的玻璃挡板，通风20min后，即可进行无菌操作。（此步由专人统一负责）
2、接种室灭菌过程中同时对外植体进行表面灭菌。先将接种材料在流动的自来水下涮洗干净，吸干水份后切成大约70mm长的片段放进500ml烧杯中，用蒸馏水冲洗2次，倒掉蒸馏水后倒入0.1%的升汞水消毒，将材料淹没浸泡约10分钟（期间用镊子搅拌几次）。
3、把在消毒液中的接种材料转移到超净工作台上。用无菌镊子将已完成灭菌的接种材料转移到烧杯中，用无菌水清洗3次，每次不少于1分钟，洗时不断摇动烧杯以确保完全除去消毒液。
最后一次清洗后转移到无菌托碟上，将接种材料切成一定大小（花托0.5cm2、茎段0.5-1cm）。
4、取下培养瓶的盖子用火烧灼瓶口。用镊子将外植体轻轻插入到琼脂上，立即盖上盖子。
5、操作完后将镊子等器械浸入75%酒精中。操作器械需要在每次使用前消毒一次。方法是将浸于酒精中的器械取出后置于酒精灯火焰上充分灼烧，待冷却后方可使用。
6、将培养瓶放到培养箱里，在要求温度下培养，观察记录。

植物组织培养一定要经过愈伤组途径吗

植物组织培养一定要经愈伤组织途径吗植物的组织培养中，从一块外植体形成典型的愈伤组织，大致要经历三个时期：启动期、分裂期和形成期。

植物组织培养一般需要使用含有植物激素培养液吗

植物如果能够自己提供激素的话,一般是不需要人提供的,但是人提供的在一定范围内能帮助植物生长,超出范围就会抑制植物的生长,所以要有一个范围,并且植物生长的一些部位受到不同浓度的控制,使用激素要注意技术的浓度.

植物组织培养一般用什么样的培养基？求解

无菌条件下，将从机体取得的组织块或细胞置于体外的模拟体内各种条件下进行培养，培养条件包括适宜的营养液、O2、CO2、PH值、渗透压与温度等，还要防止微生物污染。可在倒置相差显微镜下直接观察生活级胞的运动、增殖、分化、吞噬等动态变化，并可用显微摄相、显微摄电影或显微录影等真实记录下生活细胞连续变化的过程强。
该技术是一种比较简便、反应敏锐的实用方法，目前已建立多种细胞株，并已广泛用于实验研究。也可应用组织培养细胞研究各种物理、化学及生物因素对细胞的直接作用。组织培养术与上述各种技术密切配合,可获得单纯从体内实验难以达到的效果。　

婚姻破裂一般要经历哪几个阶段？

婚姻感情的破裂通常都要经历四个时期：一、矛盾期。夫妻经过恋爱的炽热期后，便进入矛盾期，若矛盾未能及时解决，便化成缠绕不清的争执。一般说，矛盾纠纷在低文化层次和胆汁质、多血质的当事者中多表现于外泄，如口角、殴斗、毁物等。经斡旋，可解决，但过后又重演，内战不息。在高文化层次和粘液质、抑郁质的当事者中多表现于内郁，即外表上不争不吵，但内心彼此冷淡，心存罅隙，斡旋不易见效。二、戒备期。矛盾纠纷的积累，夫妻逐渐产生隔阂，从而相互戒备，俗称"同床异梦"。有的从财产、收支上互相隐瞒，有的瞒着对方与异性来往等。为了防备对方抓住把柄和了解到事实真相，双方在经济、社交关系等方面相互戒备，甚至连个人的事业问题、前途问题等，也守口如瓶，层层设防像防盗一样地防备对方。三、裂痕期。隐秘总有泄露的一天。隐秘的泄露造成更严重的纠纷，便加重隔阂与戒备，结果形成恶性回圈，终于出现感情裂痕。感情裂痕表现在情绪上是强烈的不满，表现在行为上是相互的背离。这时，有居住条件的大多分居；无居住条件的，即使同居，也是背靠背，井水不犯河水。四、破裂期。裂痕越来越大，最后感情彻底破裂。来自 :99weiqing.