Question

用大肠杆菌生产人的胰岛素的详细步骤

记住，是大肠杆菌，不是其他，步骤要细化，今晚就要用，求～～～～～～～～～～～～～～～～～

Answer 1

大肠杆菌产生胰岛素并进行批量生产的原理是运用到了现代生物技术的转基因技术，它是先将人胰岛素基因从人的染色体上分离出来，插入从细菌细胞中提取出来的质粒(一种小圆环状DNA)中，再将这个合并起来的、带有胰岛素基因的质粒，转移入大肠杆菌的细胞中，随后该胰岛素基因会指导大肠杆菌细胞产生胰岛素，人类即可将这些胰岛素提取并收集出来，用于治疗糖尿病病人。

那么如何利用大肠杆菌生产胰岛素 呢？下面从基因工程角度说一下。

1.提取目的基因:
既从人的DNA中提取胰岛素基因,可使用限制性内切酶将目的基因从原DNA中分离.
2.提取质粒:
使用细胞工程,培养大肠杆菌,从大肠杆菌的细胞质中提取质粒,质粒为环状.
3.基因重组:
取出目的基因与质粒,先利用同种限制性内切酶将质粒切开,再使用DNA连接酶将目的基因与质粒"缝合",形成一个能表达出胰岛素的DNA质粒.
4.将质粒送回大肠杆菌:
再大肠杆菌的培养液中加入含有Ca+的物质,如CaCl2,这使细胞会吸收外源基因.此时将重组的质粒也放入培养液中,大肠杆菌便会将重组质粒吸收.
5.胰岛素的产生:
再大肠杆菌内,质粒通过表达转录与翻译后,便产生出胰岛素蛋白质.通过大肠杆菌的大量繁衍,便可大量生产出胰岛素!

Answer 2

人体的生产胰岛素基因注入大肠杆菌细胞内，然后通过细胞分裂就可以得到大量带有该基因的菌群就可以生产胰岛素了！

Answer 3

他们我觉得应该是要从cdna文库中选取目的基因，因为人的基因中含有内含子和外显子，但是大肠杆菌不能识别这个，所以说从人体内直接提取的DNA，应该是不可以用来，直接产生胰岛素的