多极质谱进行蛋白质多肽测序的原理是什么
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2022-09-28 · 百度认证:北京惠企网络技术有限公司官方账号
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根据一级质谱可以测得多肽整体的分子量,多肽碎裂时会产生一系列在肽链不同位置断裂而形成的碎片离子,可以得到多肽的二级谱图,根据二级质谱相近谱峰之间的质量数之差可以推算出对应的氨基酸序列。
由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽,同理类推还有三肽、四肽、五肽等。通常由10~100个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫多肽。
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一般肽中含有的氨基酸的数目为二到九,根据肽中氨基酸的数量的不同,肽有多种不同的称呼:由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽,同理类推还有三肽、四肽、五肽等,一直到九肽。通常由10~100个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫多肽,它们的分子量低于10,000Da(Dalton,道尔顿),能透过半透膜,不被三氯乙酸及硫酸铵所沉淀。
也有文献把由2~10个氨基酸组成的肽称为寡肽(小分子肽);10~50个氨基酸组成的肽称为多肽;由50个以上的氨基酸组成的肽就称为蛋白质,换言之,蛋白质有时也被称为多肽。多肽也简称为肽,是20世纪被发现的。
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多极质谱(Multi-stage Mass Spectrometry,通常表示为MS^n,n表示质谱分析的阶段数)用于蛋白质多肽测序的原理基于质荷比(m/z)的测量。首先,蛋白质样本通过酶解或化学方法被切割成多肽片段。这些多肽片段随后被电离,转化为带电的离子,然后被引入到质谱仪中。在多极质谱中,不同的分析模式(如电离源、质量分析器等)串联使用,使得可以对多肽离子进行选择性隔离、碎裂(通过碰撞诱导解离等方法),再测量碎片离子的m/z值。通过分析这些碎片离子的质荷比和强度,可以推断出多肽的序列,从而实现蛋白质多肽的测序。
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