Question

克隆载体和表达载体的区别

Answer 1

1、克隆载体：采用从病毒、质粒或高等生物细胞中获取的DNA作为克隆载体，在载体上插入合适大小的 外源DNA片段，并注意不能破坏载体的自我复制性质。将重组后的载体引入到宿主细胞中，并在宿主细胞中大量繁殖。
2、表达载体：在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件(如启动子、RBS、终止子等)，使目的基因能够表达的载体。
二、要求不同
1、克隆载体：能在宿主细胞中复制繁殖，而且最好要有较高的自主复制能力；容易进入宿主细胞，而且进入效率越高越好；容易从宿主细胞中分离纯化出来， 这才便于重组操作。
2、表达载体：常用细菌质粒进行构建，构建过程中运用限制性核酸内切酶切割出与目的基因相合的末端（多为黏性末端，也有平末端），采用DNA连接酶连接，导入生物体实现表达。
三、组成部分不同
1、克隆载体：病毒、质粒或高等生物细胞。
2、表达载体：目的基因、启动子、终止子、标记基因。

Answer 2

分子克隆过程中往往需要借助特殊的工具才能使目的 DNA分子进入细胞中并进行复制和表达。这种携带外源目的基因或 DNA 片段进入宿主细胞进行复制和表达的工具称之为载体，其本质是 DNA（少数为RNA）。

分子克隆所用的载体需具有以下特性∶①在宿主细胞中能自我复制，即本身是复制子；②容易从宿主细胞中分离纯化；③载体 DNA分子中有一段不影响它们扩增的非必需区域，插在其中的外源基因可以像载体的正常组分一样进行复制和扩增；④有限制性酶切的克隆位点，以便于目的基因的组装；⑤能赋予细胞特殊的遗传标记，以便于对导入的重组体进行鉴定和检测；⑥用于表达目的基因的载体还应具有启动子（强启动子）、增强子、SD序列、终止子等。

载体按功能可分为克隆载体和表达载体两种基本类型。

克隆载体是最简单的载体，主要用来克隆和扩增 DNA 片段，有一个松弛的复制子，能带动外源基因在宿主细胞中复制扩增。克隆载体目前主要有质粒载体（plasmid vector）、噬菌体载体（phage vector）、人工染色体（artificial chromosome）等