马铃薯帚顶病毒病的理化性质是什么?
2019-07-09 · 农业农村部直属的大型综合出版社
病毒名称:马铃薯帚顶病毒Potato mop-top virus(PMTV)。
分类地位:马铃薯帚顶病毒属Pomovirus。在国际病毒分类委员会(ICTV)中的编码为00.086.0.01.005。
病毒提纯:病叶加0.025mol/L(pH5.5)醋酸钠(含0.05%V/V硫代甘油thioglycerol),研碎,纱布过滤,10000g离心20min。沉淀用原过滤液一半量的0.05mol/L(pH8.7)TrisHCl缓冲液和0.15%(W/V)尿素悬浮,4℃下搅拌2h,加等量氯仿澄清,10000g离心15min,留水相,玻璃棉过滤,经55%(W/V)蔗糖垫离心,76000g离心160min,沉淀加0.05mol/L(pH8.7)TrisHCl缓冲液和0.3%(W/V)尿素悬浮,8000g离心5min,反复2次以上蔗糖垫离心,所得沉淀都悬浮于0.1mol/L(pH8.7)Tris HCl缓冲液,进一步纯化通过CsCl梯度离心(Torrance et al.,1993)。
病毒理化特性:
①病毒粒子:直棒状,100~150nm或250~300nm*18~20nm,沉降系数126S,171S和239S。
②核酸:单链RNA,包括3种单链RNA,典型株系(T-分离物)的RNA全长为:6043nt(RNA1)、2962nt(RNA2)和2315nt(RNA3)(Kashiwazaki et al.,1995);苏格兰分离物(S-分离物)的RNA3全长至少比T-分离物的RNA3长出543nt(Reavy et al.,1998),瑞典-分离物(PMTV-Sw)的RNA 3长3134nt(Sandgren et al.,2001)。
③蛋白:分子质量18000~20000u,大量的外壳蛋白分子质量为19720u,少量的是连读蛋白readthrough protein,是被外壳蛋白末端密码子抑制而产生的(Cowan et al.,1997),T-分离物的速读蛋白,分子质量为66900u(Kashiwazaki et al.,1995),S-分离物的速读蛋白是87000u(Reavy et al.,1998)和Sw-分离物的是91000u。
株系:典型株系比其他多数分离物的致病力强,侵染许多烟草属植物产生坏死斑。苏格兰分离物和瑞典的PMTV-Sw,属T-分离物,不经真菌介体传,RNA3较短,分离物间血清变异不大。
其他:马铃薯帚顶病毒和烟草脆裂病毒在马铃薯上的症状相似,但两病毒在苋色藜上的症状不同,马铃薯帚顶病毒不侵染菜豆,烟草脆裂病毒的介体是土壤中线虫Trichodorusspp.,土壤风干能杀死线虫。马铃薯帚顶病毒的粒子大小、形态、在苋色藜、德伯纳烟、烟草上的症状,同其他马铃薯病毒有区别,这些症状同其他Pomovirus属的病毒也有别。RT-PCR是检测马铃薯帚顶病毒的最可靠和灵敏的方法(Arif et al.,1994),然而,病毒在病叶内分布不匀,会发生取样问题。