血液DNA提取过程中,取上清应注意事项。。。
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过程:将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA,然后将沉淀溶于水中,使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66%
٠80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入SDS.
注意:
1.
各操作步骤要轻柔,尽量减少DNA的人为降解。
2.
取各上清时,不应贪多,以防非核酸类成分干扰。
٠80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入SDS.
注意:
1.
各操作步骤要轻柔,尽量减少DNA的人为降解。
2.
取各上清时,不应贪多,以防非核酸类成分干扰。
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