Question

血清钠的医学检查

Answer 1

血液生化检查 > 血液无机物测定

原理
火焰光度计法
火焰光度分析是一种发射光谱分析。样品中的钠原子受火焰热能作用而被激发处于激发态，激发态的原子不稳定迅速回到基态，放出能量，发射出元素特有波长的辐射谱线。钠发射光一般在589nm处，用相应波长的滤光片将谱线分离，然后通过光电管或光电池转换成电信号，经放大后进行测量。样品中钠的浓度越大，所发射的光愈强。用已知含量的标准液与待测样本液对比，即可计算出血、尿等标本中钠的浓度。内标法用钠电信号与锂的电信号的比值作为定量参数。 离子选择去电极分析法是以测量电池的电动势为基础的定量分析方法。将离子选择去电极和一个参比电极连接起来，置于待测的电解质溶液中构成原电池，参比电极为负极，离子选择性电极为正极，此电池的电动势（E）与被测离子活度对数符合能斯特（Nernst）方程：
E=E0+(2.303RT/nF)logAx*Fx
E=离子选择去电极在测量溶液中的电位；E0=离子选择去电极的标准电极电位；n=被测离子的电荷数；R=气体常数（8.314J/K·mol）；T=绝对温度（273+t℃）；F=法拉第常数（96487C/mol）；Ax=被测离子的活度；Fx=被测离子的活度系数。
上式表明，在一定条件下，原电池的电动势与被测离子活度的对数呈线性关系。因此，只要通过测量电池电动势，即可求得被测离子活度。
酶动力学法
邻硝基苯-β，D-半乳糖苷在钠—依赖性β-半乳糖苷酶作用下生成邻硝基苯酚和半乳糖，邻硝基苯酚生成速率与标本中钠离子的浓度成正比，在405nm波长处监测邻硝基苯酚吸光度的变化，可以计算出钠离子的含量。
火焰光度计法：
1.钠标准贮存液（200mmol/L）：精确称取经110℃烘烤4h以上并置于干燥器至恒重的氯化钠（AR）11.691g，用去离子水溶解后移入1L容量瓶中，再稀释至刻度。
2.钠标准应用液I（钠1.2mmol/L）：取钠标准贮存液6ml于1L容量瓶中，用去离子水稀释至刻度（内标法用锂应用液稀释至刻度），贮存在塑料瓶中备用。
3.钠标准应用液Ⅱ（钠1.4mmol/L）：取钠标准贮存液7ml于1L容量瓶中，用去离子水稀释至刻度（内标法用锂应用液稀释至刻度），贮存在塑料瓶中备用。
④钠标准应用液Ⅲ（钠1.6mmol/L）：取钠标准贮存液8ml于1L容量瓶中，用去离子水稀释至刻度（内标法用锂应用液稀释至刻度），贮存在塑料瓶中备用。
⑤锂贮存液（1.5mol/L）：称取硝酸锂103.43g，用去离子水溶解后移入容量瓶中，再稀释至刻度，其他锂盐称量是：氯化锂63.59g/L，碳酸锂55.42g/L，硫酸锂（Li4SO4·H2O）95.97g/L，溶解后，贮存于聚乙烯瓶内。
⑥锂应用液（15mmol/L）：将锂贮存液用蒸馏水稀释100倍，贮存于聚乙烯瓶内。
离子选择去电极法：
1.各厂家生产的仪器都有配套试剂供应，其配方未完全公开。
酶动力学法：
1.目前主要是德国宝灵曼（Boehringer Mannheim BM）公司生产的钾钠酶法试剂盒。均为双试剂。
标准液：
1.第一标准K 2.5mmol/L，Na140mmol/L。
2.第二标准 K 8.0mmol/L，Na175mmol/L。
火焰光度计法
目前各实验室使用的火焰光度计有两种测量方法：直接测定法和内标准测定法。
1.直接测定法：首先配制不同浓度的钠标准液，测量其发射光强度并记下读数，再以浓度为横坐标，检流计读数为纵坐标，绘制标准曲线，此后根据标本的读数从标准曲线上查钠含量。血清钠也可用120mmol/L、140mmol/L、160mmol/L 3个标准液作比较法测定，每次同时作高、中、低3个浓度标准，使测定标本的读数在高、低两个标准液读数之间，然后按下列公式计算：
钠浓度（mmol/L）=<(测定标本读数-低标准读数）/（高标准读数-低标准读数）*（高标准读数-低标准读数）+低标准读数>*稀释倍数
2.内标准测定法：用含锂的标准稀释液稀释样品，用钠电信号与锂电信号的比值为定量参数，进行测量计算，此种火焰光度计多数能直接显示测定结果。此种方法能减少火焰不稳定引起的误差，从而提高精密度与准确度。
附注：
1.本法的线性范围：
Na：100～160mmol/L （血清）
0～200mmol/L （尿）
2.高脂血症或高蛋白血症对本法有影响，主要是引起钠离子假性降低，原因是异常增高的脂质或蛋白质减少了同体积血浆水的相对含量。当脂血TG达10mmol/L时，血清Na+约低1%，以后TG每升高5mmol/L，实测钾钠以1%的比例偏低。所以当TG≤15mmol/L时，实测钠偏低≤2%，不必校正。若TG>15mmol/L时，则可按下式求得校正因数：F=0.994+0.002 TG（mmol/L），以实测、Na+浓度×F即得校正后的结果。如果干扰是由蛋白质引起的，则FAES法不适宜，应使用ISE法测定。
3.尿液标本钠浓度波动范围很大，故稀释倍数要作适当调整，使尿钠的测定读数位于高、中、低3个标准管中2个标准读数之间，以便作比较法计算尿钠浓度。稀释方法见表2。
尿稀释方法 尿（ml） 去离子水（ml)或锂应用液 稀释倍数 0.5 9.5 20 0.5 49.5 100 1:100稀释尿2.0 8.0 500 1:100稀释尿1.0 9.0 1000 4.火焰光度计的各种管道应保持通畅，不得有堵塞。
5如果燃气纯度不够，火焰稳定性差，本底读数可能不稳定，测定时常需修正读数零点。必须注意燃气助燃的比例，流速，压力等均会影响火焰对样品元素的激发和测量。
6.用锂（硝酸锂或氯化锂等锂盐）作稀释的内标准溶液配制后，严禁放在玻璃瓶中，以防止锂离子进入硼硅玻璃中，而引起浓度下降，配好后，应立即置入聚乙烯瓶中保存。
7.测定用的玻璃器皿必须用去离子水冲洗干净，不得有离子污染，测定时宜用小型烧杯，吸液前后液面差距尽量小，不宜用小口径试管。
8.每次测定应用定值血清作质控，若失控，应及时找原因。
9.国产直接法火焰光度计测钠时，用140mmol/L钠标准作单点定标误差大，应多点定标测定。
离子选择去电极法
用离子选择电极测量钠的方法有两种，一种是直接电位法，一种是间接电位法。
1.直接电位法：样品（血清、血浆、全血）或标准液不经稀释直接进入ISE管道作电位分析。此法能真实反映符合生理意义的血清中离子的活度，故报告方式为血清钠mmol/L活度。
2.间接电位法：样品（血清、血浆、脑脊液）与标准液要用指定离子强度与pH值的稀释液作一定比例稀释，再送入电极管道测定其电位，这时样品和标准液的pH值与离子强度趋向一致，所测溶液的离子活度等于离子浓度。以mmol/L浓度报告。
不同型号的ISE分析仪操作方法有所不同，一般要进行下列步骤：
A.开启仪器，清洗管道。用活化液活化电极。
B.用适合本仪器的低、高值斜率定标液进行两点定标。
C.间接电位法的样品由仪器自动稀释后进行测定，直接电位法可直接将样品吸入电极管道进行测定。
D.测定结果由仪器内计算机处理计算后打印出数据。
E.每天用完后，清洗电极和管道后再关机，也可不关。
附注：
1.本法线性范围：
Na+直接法：100～180mmol/L （血清）
30～190mmol/L （尿）
间接法：100～180mmol/L （血清）
25～150mmol/L （尿）
2.溶血，含钠离子的抗凝剂、柠檬酸钠、草酸盐及EDTA对试验均有干扰。
3.用ISE法测定尿中钾钠线性范围有限，易受到尿中的离子组分的干扰。
4.某些药物，例如碘解磷定，可以通过碘作用于电极膜，而造成K+假性降低。商品质控血清常使用乙二醇作为保护剂，其含量达30%（乙二醇常用浓度）时，对Na+测定产生正干扰，偏差达4.0%～9.5%，不可忽视。
5.温度影响离子的活性，故刚从冰箱中取出的标本及试剂应恢复到室温才进行测定。