双缩脲法测定蛋白质含量需注意哪些问题
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双缩脲法测定蛋白质含量需注意哪些问题
您好！为您推荐相关信息如下：
1. 碱性环境：在使用双缩脲试剂时，必须先加入0.1 g/mL氢氧化钠溶液，再加入0.01 g/mL硫酸铜的水溶液。若顺序颠倒，硫酸铜会与氢氧化钠发生复分解反应，生成蓝色氢氧化铜沉淀，导致现象不清，无法达到实验目的。
2. 蛋白质浓度：双缩脲法适用于0.5g/L～10g/L含量的蛋白质溶液测定。
祝您生活愉快，身体健康！
咨询记录 · 回答于2024-01-16
双缩脲法测定蛋白质含量需注意哪些问题
双缩脲法测定蛋白质含量需注意哪些问题
双缩脲法测定蛋白质含量需要注意以下问题：
1. 碱性环境：在使用双缩脲试剂时，必须先加0.1 g/mL氢氧化钠溶液，然后再加入0.01 g/mL硫酸铜的水溶液。如果先加入硫酸铜溶液，再加入氢氧化钠溶液，则无法充分制造碱性环境，此时硫酸铜会与氢氧化钠发生复分解反应，生成蓝色氢氧化铜沉淀，导致现象不清，无法较好地达到实验目的。
2. 蛋白质浓度：双缩脲法常用于测定0.5g/L～10g/L含量的蛋白质溶液。
以上内容仅供参考，如需更多信息，建议查阅相关文献或咨询专业人士。
**双缩脲法测定蛋白质含量的干扰因素**
双缩脲法测定蛋白质含量的干扰因素主要有三羟甲基氨基甲烷、一些氨基酸和EDTA。
双缩脲法是一个用于鉴定蛋白质的分析方法。双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液，呈蓝色，由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制。当底物中含有肽键时，试液中的铜与多肽配位，配合物呈紫色。可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5~160mg/ml。
如您还有其他问题，欢迎继续向我提问。祝您健康、愉快！
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