Question

2.如何从分离到的纯培养物的代谢产物中筛选其抗菌活性?(50 (

Answer 1

问：2.如何从分离到的纯培养物的代谢产物中筛选其抗菌活性?(50 (

答：您好，为您整理答案如下：1.从采集的7个土样中，分离筛选到104株真菌。有4株真菌对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和苏云金芽胞杆菌具有抗菌活性。以其中两个活性菌株为研究对象，结合形态学观察和分子生物学鉴定分析其种属地位，最终确定菌株PA-33为桔青霉，并命名为PenicilliumcitrinumPA-33;菌株PC-5为青霉属，并命名为Penicilliumsp.PC-5。2.对桔青霉PA-33的发酵液稳定性、抗菌谱及抗菌活性物质的分离提纯等进行初步研究。枯青霉PA-33对21种病原菌有抗菌活性；具发酵液对热、自然光、紫外光和酸碱的稳定性均较强。乙酸乙酯粗提物对金黄色葡萄球菌的MIC为7.5mg/mL、对苏云金芽抱杆菌的MIC为7.5mg/mL对大肠杆菌的MIC为940ug/mL、对枯草芽抱杆菌的MIC为1.88mg/mL；最终得到活性纯品14，其(1mg/mL对苏云金芽胞杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑菌圈直径分别为16.23mm14.43mm>15.43mm和17.07mm。

答：3.采用单因素实验、响应曲面法、三元二次通用旋转组合设计和频率分析法优化枯青霉PA-33发酵工艺。经优化后，最佳发酵培养基配方为马铃薯219.91g/L、

答：甘露醇34.11g/L、黄豆饼粉 6.25g/L；最适发酵条件为装液量50mL、接种量3.5%、初始pH自然、发酵温度28℃，摇床转速150r/min、发酵天数12d。优化后发酵液对大肠杆菌的抑菌圈直径为28.99mm，较优化前抑菌圈直径18.73mm，增加了10.26mm4.以桔青霉PA-33菌株为出发菌株，大肠杆菌为指示菌，分别采用紫外诱变、紫外-LiCl诱变、紫外-亚硝酸复合诱变、微波诱变以及微波-超声波-硫酸二乙酯(DES复合诱变对其抱子悬液进行诱变。筛选得到5株高产抗生素突变菌株 Li-1、N-25、H-14、WB-6和D-11，与原始菌株抑菌圈直径18.73mnffi比，其抗菌活性分别增长39.51%、39.19%、40.26%、32.29咐口 28.51%。其中突变菌株 Li-1、H-14、N-25遗传稳定性较好，突变菌株WB-阴口D-11遗传稳定性相对较差。5.测定青霉PC-5对22种病原菌的抗菌活性和发酵液的稳定性，并采用Plackett-Burman 设计试验和Box-Behnken响应曲面法优化其最佳发酵发酵培养基。青霉PC-5发酵液对19种病原菌具

答：具有抗菌活性，具发酵液对温度和酸碱的稳定性较强，对光的稳定性很强；经优化后，青霉PC-5最佳发酵培养基配方为342.62g/L、玉米粉 52.42g/L、MgSO40.3g/L，优化后发酵培养基的抑菌圈直径为29.44mm，与基础培养基发酵液抑菌圈直径18.27mm相比，增加了11.17mm，抗菌活性提高61.14%。