为什么PCR中最后加入DNA

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摘要 亲,您好!
为什么PCR中最后加入DNA?
答:PCR中最后加入DNA的原因如下:
DNA的复制需要RNA引物,这是由DNA聚合酶和RNA聚合酶的特性决定的。DNA聚合酶不能从头合成DNA(需要引物DNA或RNA)。因为DNA聚合酶具有高保真系统,这个系统要求,在新链的延伸过程中,只有新添加的碱基与模板链形成双螺旋才能继续链的延伸,否则延伸终止,启动切除修复机制,直至添加正确的碱基。也即是说,在DNA聚合酶的上游位置一定要互补形成双链(可以是RNA-DNA)才能继续下游DNA的合成。这是由它的忠实性和高保真系统决定的。而RNA聚合酶可以从头合成RNA,合成的RNA游离在模板外,不需要与模板形成互补配对的双螺旋结构就能继续下游的合成。两种酶的不同机制决定了DNA复制时用的只能是RNA引物。
PCR反应中所用到的DNA引物,是用化学法人工合成的,与模板形成双链后在DNA聚合酶的作用下就可以继续链的延伸;而在体内,由于DNA聚合酶的忠实性,不能从头合成DNA,因此只能采用RNA引物来延伸。
咨询记录 · 回答于2023-12-27
为什么PCR中最后加入DNA
亲,您好我是百度生活老师大莉,擅长生活交通灵域,很高兴为您解答,大字需要时间请您稍等片刻。
亲, PCR中最后加入DNA的原因是: DNA的复制需要RNA引物,这是由DNA聚合酶和RNA聚合酶的特性决定的。DNA聚合酶不能从头合成DNA(需要引物DNA或RNA),因为DNA聚合酶具有高保真系统。这个系统要求,在新链的延伸过程中,只有新添加的碱基与模板链形成双螺旋才能继续链的延伸,否则延伸终止,启动切除修复机制,直至添加正确的碱基。也即是说,在DNA聚合酶的上游位置一定要互补形成双链(可以是RNA-DNA)才能继续下游DNA的合成。这是它的忠实性和高保真系统决定的。而RNA聚合酶可以从头合成RNA,合成的RNA游离在模板外,不需要与模板形成互补配对的双螺旋结构就能继续下游的合成。两种酶的不同机制决定了DNA复制时用的只能是RNA引物。 PCR反应中所用到的DNA引物,是用化学法人工合成的,与模板形成双链后在DNA聚合酶的作用下就可以继续链的延伸;而在体内,由于DNA聚合酶的忠实性,不能从头合成DNA,因此只能采用RNA引物来延伸了。
您的回答是为什么要用rna为引物,并非我想要的答案,请您正面并专业的回答我的问题,谢谢
因为PCR的目的就是要扩增DNA片段。
# 相当于是广大目标物的浓度呀。 你想一下,一滴血中的DNA量能有多少呀,就这样直接的去查,怎么查呀。 要是扩增,一个变俩,俩再变四,四再变八……,一般扩增只是一个过程的循环,这么循环30至40次,那么目标DNA的浓度就相当于是被放大了二的30至40次方。 这样的浓度再被用于各种研究就非常的方便了。
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