Question

柱层析的基本操作过程+1、装柱2、(+)3、加样4、洗脱5、收集

Answer 1

问：柱层析的基本操作过程+1、装柱2、(+)3、加样4、洗脱5、收集

答：1．装柱取一支洁净干燥的层析柱玻管，自柱口塞入少察亮毁许脱脂棉并用长玻棒推至柱底压平（塞时不宜太紧）。然后用漏斗从柱口小心装入约5g硅胶（100~160目）（四分之三高度，干法装柱），边装边用手指敲打层析柱，使填装紧密均匀。再在柱顶加入一薄层脱键配脂棉花（约0.5cm厚）。将此层析柱固定在铁架台上。2．加样称取研磨研细的菠菜叶2.0~3.0g于25mL烧杯中，量取10mL石油醚：丙酮=1:1（体败备积比）的混合液溶解浸泡，用封口薄膜封住杯口，浸泡10min,倒出浸出液静置分层，用刻度胶头滴管吸取1.0mL上样分析，注意上样应沿管壁。（注意：胶头刻度滴管应是干燥的）3．洗脱、分离慢慢加入石油醚：丙酮=95:5（体积比）的洗脱液约10mL洗脱，在柱上可以看到黄色的色带。再继续加石油醚：丙酮=2:8（体积比）的洗脱液约10mL洗脱，在柱上可以看到绿色的色带。