生物试卷高中
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生物试卷高中答案是(1)磷酸二酯键；限制/限制性核酸内切(2）碱基互补配对；PCR；耐高温(3)Cas9蛋白；农杆菌转化法/农杆菌；种类、数目、排列顺序(4)其他基因序列也可能含有能与sgRNA互补配对的序列，造成sgRNA和Cas9的错误结合并且剪切
咨询记录 · 回答于2023-01-04
生物试卷高中
生物试卷高中答案是(1)磷酸二酯键；限制/限制性核酸内切(2）碱基互补配对；PCR；耐高温(3)Cas9蛋白；农杆菌转化法/农杆菌；种类、数目、排列顺序(4)其他基因序列也可能含有能与sgRNA互补配对的序列，造成sgRNA和Cas9的错误结合并且剪切
(1)Cas9蛋白可催化磷酸二酯键水解，剪切特定DNA片段，这一功能与限制/限制性核酸内切酶相似。(2)要确定RuBisCo基因中的待编辑序列，根据碱基互补配对原则设计引物，通过PCR技术扩增相应的基因序列，作为编码特定sgRNA的模板。该技术所需的Taq酶特点是耐高温，能使整个反应体系中DNA解链退火、链的延伸都能快速进行。(3)将扩增获得的DNA片段与Cas9蛋白基因共同导入到质粒载体，构建CRISPR/Cas9表达载体，将构建成功的表达载体通过农杆菌转化法/农杆菌方法，导入大豆细胞。若检测到受体细胞中组成RuBisCo酶的氨基酸种类、数目、排列顺序发生了符合预期的改变，则表明基因编辑成功。(4)因为其他基因序列也可能含有能与sgRNA互补配对的序列，造成sgRNA和Cas9的错误结合并且剪切
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