Question

水煮法提取DNA 的详细过程

Answer 1

问：水煮法提取DNA 的详细过程

答：您好，您的问题我已经看到了，正在整理答案，请稍等一会儿哦~

问：好的，有视频的过程吗？

答：您好，您的问题答案是：利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA，然后将沉淀溶于水中，使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66% ٠80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入SDS.

答：您好，很抱歉没有视频过程。

答：您好，为您找到更细致的过程文字：水煮法提取DNA

答：【试剂】

答：缓冲液和溶液：用于筛选质粒的抗生素；氯霉素（ 34mg/ml ）；选用：乙醇；异丙醇(PH8.0)

答：酶和缓冲液：溶菌酶（ 10mg/ml ）；限制性内切核酸酶

答：凝胶：琼脂糖凝胶

答：【实验操作过程】

答：1、将500ml 培养物的细菌沉淀物重悬于用冰预冷的10mlSTET【（0.1mol/L NaCl10mmol/L

答：Tris·Cl（pH8.0）1mmol/L EDTA（pH 8.0）】中。将悬液移入50ml锥瓶中。

答：2、加入1ml新配制的溶菌酶溶液[10mg/ml，沉淀于10mmol/L

答：Tris.Cl（pH8.0）]。如溶液的pH值低于0.8溶菌酶不能有效地发挥作用。

答：3、用一个夹子把锥瓶放在酒精灯的明火上加热，直至液体恰好开始沸腾，不停地摇晃锥瓶。

答：4、立即把瓶浸入装有沸水的大烧杯（2L）中，将瓶放在沸水中，时间恰为40s。

答：5、将瓶浸入用冰预冷的水中5min，使之冷却。

答：6、将粘稠状内容物从瓶中转移到超离心管，于4℃以30

答：000rpm离心30min。原有的细菌物生长得越密，应越难将粘稠状裂解物转移到离心管中。必要时，可用长刀片和剪刀将裂解物剪成大小适于操作的大团块，或抽入10ml注射器的针筒中使之部分剪切。从用氯霉素处理的细菌培养物中分离质粒DNA时，一般不会出现这样的问题。如果细菌碎片没能形成紧密的团块，可以以35000rpm再度离心20min，然后尽可能将上清转移到另一管内，弃去残存在管内的粘稠状液体。

答：7、将上清转移到另一管内，纯化质粒DNA。

问：按照上面操作就可完成是不是？

答：您好，这个是实验操作理论。

问：这个方法也可以用麻黄草提炼成麻黄素？

问：能不能亲手教教？

答：您好，提取麻黄素，需要有关资质才能进行，国家管制。

问：知道了，上面的方法是可以提取麻黄素对吧？

答：您好，通用方法不是这种，因为效率太低。

问：用什么物质可以快速提取到麻黄素？

答：您好，正在为您查询，请稍等。

答：您好，(1)预处理：将麻黄草用质量分数为1-5％的碳酸氢钠溶液，浸泡5-10min，除去表面的杂质，再送入真空低温冷风干燥机中，于33-35℃干燥至含水量为18-20％；此条件下预处理的麻黄草有效成分得到了最大的保留，同时麻黄碱的提取效率也是最高。(2)制粉：将预处理后的麻黄草送入固体粉碎机中，制成微粉，然后向微粉中加入碳酸钾粉末和碳酸钠粉末，搅拌均匀后，得到微粉混合物；(3)萃取：将微粉混合物送入萃取釜中，用经过加压的的超临界流体CO2进入萃取釜混合进行萃取2-4h，萃取完毕后进入分离釜Ⅰ、Ⅱ内进行分离，得到麻黄碱粗提物；(4)沉淀：将麻黄碱粗提物分散于无水乙醇中，然后加入麻黄碱粗提物自身质量1-3％的沉淀剂，30-35℃搅拌0.5-1h，过滤，所得滤液用质量分数10-15％的盐酸，调节pH为6-6.5，过滤，所得沉淀用乙醚洗去杂质；(5)脱色、结晶：将步骤4中的固体溶解于去离子水中，接着加入麻黄碱粗提物自身质量1-3％的脱色剂，30-35℃搅拌20-40min，过滤，所得滤液减压浓缩至含水量为10-15％，密封放置于0-3℃，静置0.5-4h，析出晶体，过滤即得到麻黄碱成品。所述沉淀剂的制备方法为：将钛酸加入到去离子水中，用质量分数为5％的盐酸调节溶液的pH为5.5-6，40℃搅拌至钛酸完全溶解，然后加入山梨糖醇和苹果酯，回流搅拌0.5-4h，趁热过滤，所得沉淀用去离子水和无水乙醇洗去杂质，送入烘干箱中，干燥至恒重即得到沉淀剂。所述碳酸钾和碳酸钠的质量均为麻黄草质量的1-5％。所述钛酸、山梨糖醇、苹果酯的质量比为50-60：50-60：1-2。所述脱色剂的制备方法为：将甘氨酸加入到去离子水中，30℃搅拌5-10min，然后加入聚乙烯醇和三氯化铁，加热至回流状态，保温搅拌0.5-4h，过滤，所得沉淀用去离子水和无水乙醇洗去杂质，50℃真空干燥至恒重，即得到沉淀剂。所述甘氨酸、聚乙烯醇和三氯化铁的质量比为50-60：50-60：1-2。所述聚乙烯醇为医药级，分子量为110000-130000。所述萃取釜的压力为10-45MPa，温度为25-35℃，CO2流量10-45kg/h.kg；分离釜Ⅰ的工作压力为10-25MPa，温度23-35℃；分离釜Ⅱ的工作压力为5.5-12.5MPa，温度为23-35℃；分离出的溶剂CO2再经降温和压缩后，回萃取釜中循环使用。