Question

植物POD和SOD如何测定

Answer 1

问：植物POD和SOD如何测定

答：您好，POD和SOD都是一些植物抗氧化酶的指标，可以用不同的实验方法进行测定。测定POD（过氧化物酶）的方法通常是利用二苯胺作为底物，通过观察产生的颜色或荧光信号来测定POD活性。具体操作步骤包括：将植物样品加入含有过氧化氢的反应液中，使其与过氧化氢反应形成一个自由基产生体系；然后加入二苯胺，该物质能与自由基反应并产生可检测的颜色变化或荧光信号。根据这个信号的强度，就能够测定POD的活性。测定SOD（超氧化物歧化酶）的方法也比较多，其中比较常用的是氮蓝法。具体操作步骤包括：将植物样品加入含有黄嘌呤和TEMED的反应液中，在存在O2-的情况下，黄嘌呤被还原生成NBT（一种蓝色产物）；随后TEMED促进NBT在阳极上被氧化，释放电子而形成可检测的电流。根据电流值，就能够测定SOD的活性。这些实验都需要一些专业的实验室设备和试剂，如果想要进行相关实验，最好请教专业的植物生理学或生物化学实验室的老师或研究员。

问：盐胁迫下小麦SOD 的测定POD

答：您好，SOD是超氧化物歧化酶的缩写，是一种重要的抗氧化酶。盐胁迫是指在植物生长过程中，遇到高盐环境时产生的应激作用，会导致植物细胞内的一系列生理和生化变化，包括SOD的活性降低。POD是过氧化物酶，它在受到逆境刺激时也会被激活，因此可以作为盐胁迫下小麦抗氧化系统研究的指标之一。以下是小麦SOD活性和POD活性的测定方法：SOD活性测定材料： 小麦叶片组织样品 50 mM磷酸盐缓冲液（pH 7.8） 0.1 mM EDTA 50 μM NBT（硝基蓝溴离子盐） 20 μM riboflavin 光照条件步骤： 1）将小麦叶片样品置于液氮中，粉碎成细粉末状。 2）取少量叶粉，加入预冷的50 mM磷酸盐缓冲液（pH 7.8）和0.1 mM EDTA混合，制备成15%的悬浮液。在暗处保持悬浮液冷藏。 3）取0.5 mL叶粉悬浮液，加入50 μM NBT和20 μM riboflavin，放置在光照条件下（4000 LX光强，荧光灯光源），照射15分钟。 4）用无菌镊子取出反应管，将反应中断。将150 μL甲醇加入反应管中，并迅速离心10分钟，转移上清液，记录吸光度值。 5）以未经处理的样品为对照组，计算SOD活性。POD活性测定材料： 小麦叶片组织样品 0.1 M Tris-HCl缓冲液(pH 8.0) 0.1% guaiacol 0.03% H2O2步骤： 1）取小麦叶片样品，粉碎成细粉末状，在0.1 M Tris-HCl缓冲液中制备成10%的悬浮液。 2）取100 μL样品悬浮液加入1.9 mL 0.1 M Tris-HCl缓冲液(pH 8.0)、0.1% guaiacol，混合后再添加0.03% H2O2。 3）在室温下反应5分钟，记录吸光度值。 4）以未经处理的样品为对照组，计算POD活性。以上是小麦SOD和POD的测定方法，可以用于盐胁迫下小麦抗氧化系统的研究。