要证明转录因子A与其调 控的下游基因B的启动子的 互作,请列出可以采取哪些 技术?这些技术的原理及优
缺点?
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要证明转录因子A与其调控的下游基因B的启动子
例子:染色质免疫共沉淀实验(Chromatin immunoprecipitation, ChIP)
ChIP于1997年由Orlando等研发出(Orlando et al.,1997),主要用于研究转录因子与DNA结合位点的序列信息。
然后在2009年时,DominicSchmidt等将ChIP与高通量测序技术结合,发明了ChIP-seq,能够在全基因组范围内检测与蛋白相互作用的DNA区域。
ChIP原理是将染色质和与之相互作用的转录因子以及组蛋白通过甲醛等物质交联起来,然后通过超声将染色质打碎成小片段,加入针对特定转录因子或特殊修饰的组蛋白抗体,通过Protein A/Protein G微球或磁珠将抗体-转录因子-染色质复合物拖下来,通过PCR或测序的方法检测与目的蛋白相结合的DNA序列,进而研究这些转录因子在细胞发育或者生长中的作用位点。
咨询记录 · 回答于2024-01-07
缺点?
例子:染色质免疫共沉淀实验(Chromatin immunoprecipitation, ChIP)
ChIP于1997年由Orlando等研发出(Orlando et al.,1997),主要用于研究转录因子与DNA结合位点的序列信息。
然后在2009年时,DominicSchmidt等将ChIP与高通量测序技术结合,发明了ChIP-seq,能够在全基因组范围内检测与蛋白相互作用的DNA区域。
ChIP原理是将染色质和与之相互作用的转录因子以及组蛋白通过甲醛等物质交联起来,然后通过超声将染色质打碎成小片段,加入针对特定转录因子或特殊修饰的组蛋白抗体,通过Protein A/Protein G微球或磁珠将抗体-转录因子-染色质复合物拖下来,通过PCR或测序的方法检测与目的蛋白相结合的DNA序列,进而研究这些转录因子在细胞发育或者生长中的作用位点。【摘要】
要证明转录因子A与其调
控的下游基因B的启动子的
互作,请列出可以采取哪些
技术?这些技术的原理及优
控的下游基因B的启动子的
要证明转录因子A与其调
缺点?
技术?这些技术的原理及优
互作,请列出可以采取哪些
控的下游基因B的启动子的
要证明转录因子A与其调