Question

简述在进行植物组织培养过程中如何对外植体进行消毒?

Answer 1

问：简述在进行植物组织培养过程中如何对外植体进行消毒?

答：消毒前先对植物组织进行修整，去掉不需要的部分，然后用自来水冲洗。对于一些表面不光滑或长有绒毛的材料，可用洗涤剂清洗，必要时用毛刷充分刷洗，硬质材料可用刀刮。 消毒时在超净台上操作，先用70%酒精浸泡10~30s，以无菌水冲洗2~3次，然后按材料的老、嫩和枝条的坚实程度，分别采用2%次氯酸钠浸泡10~15min或用0.1%升汞浸5~10min。消毒时要不断搅动，使植物材料与消毒剂充分地接触。若材料有绒毛，最好在消毒液中加入几滴Tween-20，最后用无菌水冲洗3~5次。

问：简述培养基的配制方法。.

答：简述培养基的配制方法。.

答：1.取一袋干粉培养基，将干粉培养基溶于欲配制液体总量2/3的三蒸水，冲洗包装袋2次倒入培养液中，加入磁性搅拌棒并置于磁力搅拌器上充分搅拌，确保培养基干粉充分溶解。2.按照产品说明的要求和实验需要补加NaHCO3。3.调整培养液pH值，用pH计或pH精密试纸观察调整结果达到pH7.2-7.4。4.将上述溶液用0.22um微孔滤膜过滤除菌。5.将过滤除菌的培养液分装于贴有标签的无菌贮液瓶中，加盖瓶塞，密封4℃冰箱存放。

问：如果需要配制5L的Ms培养基，其中母液1扩大倍数为10倍，母液2扩大倍数为100倍，母液3扩大倍数为100倍，母液4扩大倍数为50倍，母液5和母液6扩大倍数均为 20 倍，请问需要吸取上述母液各多少量?。2

答：为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量，可将培养基中的各种成分，按原量的20倍或200倍分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。这样每次使用时，取其总量的1/20(50mL)或1/200(5mL)，加水稀释，制成培养液。