Question

RNA稀盐溶液提取法和DNA的提取方法侧重点有何不同

Answer 1

问：RNA稀盐溶液提取法和DNA的提取方法侧重点有何不同

答：DNA不易降解，RNA易降解

答：RNA的提取RNA的提取，通常是用0.14mol/L氯化钠溶液将组织做均浆并反复提取细胞质中的核糖核蛋白，而留下含有DNA的细胞核物质，然后用10%醋酸调至pH值为4.2时，产生沉淀，离心，弃去上清液，先用0.5mol/L氯化钠溶液，后用水洗涤沉淀，将核糖核蛋白溶解于0.5mol/L碳酸氢钠溶液中，离心在取上清液，调节pH值为4.2的沉淀，沉淀用0.5mol/L氯化钠溶液洗涤，再一次除去脱氧核糖核蛋白。核糖核蛋白中的蛋白质可用含有少量辛醇的氯*抽提除去，核酸留在碳酸氢钠水溶液中，加入乙醇，RNA即以钠盐形式沉淀出来。DNA的提取DNA主要存在于细胞核中，天然状态的DNA绝大多数是以脱氧核糖核蛋白形式存在的。从人体细胞中提取DNA时，一般先获得脱氧核糖核蛋白，再将蛋白质除去，从中分离DNA。常用的方法是以1mol/L氯化钠溶液抽提，得到的脱氧核糖核蛋白溶液与含有少量辛酸或戊酸的氯*一起振荡，除去蛋白质；或者在组织细胞破碎后以低浓度0.14mol/L氯化钠溶液（也可用0.1mol/L氯化钠加0.05mol/L柠檬酸代替）反复洗涤除去核糖核蛋白，再以1mol/L氯化钠抽提脱氧核糖

答：提取是用氯*-戊酸抽提法除去蛋白质。两种方法比较，后一种方法使核酸降解可能少一些。以稀盐溶液提取DNA时，加入适量去污剂更有助于蛋白质与DNA的分离