Question

DNA的提取实验中,要使DNA不变性,又不损失其含量,最好采用什么定量方法

Answer 1

问：DNA的提取实验中,要使DNA不变性,又不损失其含量,最好采用什么定量方法

答：使DNA不变性那就是降解了，提出来后放-20度冰箱，如果常用的话可以分装后低温保存，避免反复冻融。提取的时候使DNA变性没听过这一说，只可能是你加过裂解液DNA从细胞里释放出来后剧烈振荡了，那样会使DNA链断开的，EDTA就是保护DNA用的，NACL是提纯的时候用的，适量浓度的氯化钠可以使DNA在酒精中溶解度降到最低而使其形成沉淀，同事可以滤去蛋白质，后面要用75%酒精多洗几遍来去除NACL，不然OD比值会偏高。乙醇就是用来沉淀DNA的，也可以用异丙醇来沉淀，后面要用无水乙醇洗去异丙醇。基本上每一部提纯都会损失DNA，要根据你的实验目的来定，比如只是PCR的话就不需要那么麻烦，只是裂解出DNA即可。