高效液相色谱中固定相分类?最常用的是哪类
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2017-05-01
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高效液相色谱中固定相分类?最常用的是哪类
高效液相色谱中固定相可分为正向色谱和反向色谱
1 正相色谱法
采用极性固定相(如聚乙二醇、氨基与腈基键合相)
流动相为相对非极性的疏水性溶剂(烷烃类如正已烷、环已烷)
常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间
常用于分离中等极性和极性较强的化合物(如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等)
2 反相色谱法
一般用非极性固定相(如C18、C8)
流动相为水或缓冲液
常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间
适用于分离非极性和极性较弱的化合物
RPC在现代液相色谱中应用最为广泛
据统计,它占整个HPLC应用的80%左右
高效液相色谱中固定相可分为正向色谱和反向色谱
1 正相色谱法
采用极性固定相(如聚乙二醇、氨基与腈基键合相)
流动相为相对非极性的疏水性溶剂(烷烃类如正已烷、环已烷)
常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间
常用于分离中等极性和极性较强的化合物(如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等)
2 反相色谱法
一般用非极性固定相(如C18、C8)
流动相为水或缓冲液
常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间
适用于分离非极性和极性较弱的化合物
RPC在现代液相色谱中应用最为广泛
据统计,它占整个HPLC应用的80%左右
杭州彩谱科技有限公司
2020-07-03 广告
2020-07-03 广告
液-液色谱有正相和反相之分。如果采用极性固定相和相对非极性流动相,就称为正相;如果采用相对非极性固定相和极性流动相,则称为反相。由于极性化合物更容易被极性固定相所保留,所以正相液-液色谱系统一般可用于分离极性化合物。相反,反相液-液色谱系统...
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一、流动相
与GC流动相不同,HPLC流动相为溶剂,它既有运载作用,又和固定相一样,参予对组分的竞争,因此溶剂的选择对分离十分重要。
二、固定相载体
由于各种HPLC分离方法的流动相均为液体,因此,HPLC通常是按照固定相载体或固定液的不同来分类的。
1.
按承受压力分
刚性固体:SiO
2
为基质,耐压为7.0
×10
8
~1.0
×10
9
Pa。可制成直径、形状和孔隙
深度不同的颗粒;主要用于吸附、分配和键合色谱;
硬胶:以聚合物为基质(常用苯乙烯与二乙烯苯交联而成),耐压上限为3.5
×
10
8
Pa,
主要用于离子交换和尺寸排阻色谱。
难点解析
2.
按孔隙深度分
表面多孔型:以实心玻璃珠为基体,在基体表面覆盖一层多孔活性材料(如硅胶、氧化铝、离子交换剂、分子筛、聚酰胺等)。表面多孔型固定相的颗粒大(易装柱)、多孔层厚度小且孔浅(渗透性好,出峰快);但交换容量小。适于常规分离分析。
全多孔型:全部由硅胶或氧化铝微粒聚集而成,因颗粒极细,因而孔径小、传
质快、柱效高。特别适于复杂混合物的分离。
3.
按分离原理分:
分配色谱、吸附色谱、离子交换色谱、尺寸排阻色谱和亲和色谱等
不同分离物品适合不同方法,
具体可以看看
http://www.hudong.com/wiki/%e9%ab%98%e6%95%88%e6%b6%b2%e7%9b%b8%e8%89%b2%e8%b0%b1
与GC流动相不同,HPLC流动相为溶剂,它既有运载作用,又和固定相一样,参予对组分的竞争,因此溶剂的选择对分离十分重要。
二、固定相载体
由于各种HPLC分离方法的流动相均为液体,因此,HPLC通常是按照固定相载体或固定液的不同来分类的。
1.
按承受压力分
刚性固体:SiO
2
为基质,耐压为7.0
×10
8
~1.0
×10
9
Pa。可制成直径、形状和孔隙
深度不同的颗粒;主要用于吸附、分配和键合色谱;
硬胶:以聚合物为基质(常用苯乙烯与二乙烯苯交联而成),耐压上限为3.5
×
10
8
Pa,
主要用于离子交换和尺寸排阻色谱。
难点解析
2.
按孔隙深度分
表面多孔型:以实心玻璃珠为基体,在基体表面覆盖一层多孔活性材料(如硅胶、氧化铝、离子交换剂、分子筛、聚酰胺等)。表面多孔型固定相的颗粒大(易装柱)、多孔层厚度小且孔浅(渗透性好,出峰快);但交换容量小。适于常规分离分析。
全多孔型:全部由硅胶或氧化铝微粒聚集而成,因颗粒极细,因而孔径小、传
质快、柱效高。特别适于复杂混合物的分离。
3.
按分离原理分:
分配色谱、吸附色谱、离子交换色谱、尺寸排阻色谱和亲和色谱等
不同分离物品适合不同方法,
具体可以看看
http://www.hudong.com/wiki/%e9%ab%98%e6%95%88%e6%b6%b2%e7%9b%b8%e8%89%b2%e8%b0%b1
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