(生物)目的基因导入受体细胞是借助于细菌或病毒侵染细胞的途径。目的基因导入受体细胞是借助于细菌或病...
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这应该是基因工程的第三步吧!总的来说基因工程的基本操作步骤为1)获取目的基因;2)基因表达载体的构建(即目的基因与载体的重组):如果以质粒作为运载体,首先要用一定的限制酶切割质粒,使质粒出现一个缺口,露出黏性末端。然后用同一种限制酶切断目的基因,使其产生相同的黏性末端(部分限制性内切酶可切割出平末端,拥有相同效果)。将切下的目的基因的片段插入质粒的切口处,首先碱基互补配对结合,两个黏性末端吻合在一起,碱基之间形成氢键,再加入适量DNA连接酶,催化两条DNA链之间形成磷酸二酯键,从而将相邻的脱氧核糖核酸连接起来,形成一个重组DNA分子。3)重组DNA分子引入受体细胞中:一般是首先制备受体细胞的感受态细胞,然后通过热激或电击的方法将外源重组质粒转化到感受态细胞里!若还有不明白的,请继续追问!
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首先给你说说细菌或病毒是如何侵染细胞的。
细菌和病毒侵染受体细胞都是把自己的遗传物质注入到受体细胞内。病毒是利用自己蛋白质外壳上的固定器固定在受体细胞表面,然后把遗传物质注入到受体细胞内。细菌的细胞具体的还是不很清楚,细菌并不进入受体细胞内,也不把全部遗传物质注入到受体细胞内,比如农杆菌,就是把自己的质粒注入到受体细胞内,可能是以游离形式注入的吧。然后利用这一点,在他们可以侵染的遗传物质内放入目的基因,与他们自带的启动子,终止子,标记基因就组成了载体。这样就可以完成基因工程的转入工作啦,筛选之后,表达成功的个体就留下了。
目的基因的导入就是借鉴这个原理的!
细菌和病毒侵染受体细胞都是把自己的遗传物质注入到受体细胞内。病毒是利用自己蛋白质外壳上的固定器固定在受体细胞表面,然后把遗传物质注入到受体细胞内。细菌的细胞具体的还是不很清楚,细菌并不进入受体细胞内,也不把全部遗传物质注入到受体细胞内,比如农杆菌,就是把自己的质粒注入到受体细胞内,可能是以游离形式注入的吧。然后利用这一点,在他们可以侵染的遗传物质内放入目的基因,与他们自带的启动子,终止子,标记基因就组成了载体。这样就可以完成基因工程的转入工作啦,筛选之后,表达成功的个体就留下了。
目的基因的导入就是借鉴这个原理的!
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