Question

血清/血浆dna提取试剂盒浓度一般多少

Answer 1

血液基组dna提取试剂盒
操作步骤：
、体积全血操作步骤：
<400ul全血300ul血液处理量例
1、向300ul抗凝剂血液加入2.5倍体积solution
a颠倒混匀12000rpm离1钟弃掉清
2、再重复步骤1弃掉清
3、按照第3页附表配制solution
b与solution
c混合液（solution
b与solution
c使用量见附表）
4、加入150ul混合液用移液器吹打均匀60℃水浴或孵箱孵育10钟孵育期间颠倒混匀溶液由红色变黄绿色或棕色
5、加入等体积异丙醇充颠倒混匀至现丝状或絮状基组dna12000prm离1钟弃掉清
6、加入800ul
75%酒精颠倒数；12000prm离1钟用移液器吸掉清室温干燥10~15钟
7、加入150ul
elution
buffer60℃孵育10~15钟或夜溶解dna用移液器吹打均匀-20℃保存基组dna
二、量全血操作步骤：
1~10ml血量3ml血液处理量例
1、向3ml抗凝剂血液加入2.5倍体积solution
a颠倒混匀3000rpm离5钟弃掉清
2、再重复步骤1弃掉清
3、按照第3页附表配制solution
b与solution
c混合液（solution
b与solution
c使用量见附表）
4、加入1.5ml混合液用1ml移液器或者性塑料吸管吹打均匀60℃水浴或孵箱孵育10钟孵育期间颠倒混匀溶液由红色变黄绿色或棕色
5、加入等体积异丙醇充颠倒混匀至现丝状或絮状基组dna
6、用移液器絮状物移加800ul
75%酒精1.5ml
ep管颠倒数12000prm离3钟弃掉清室温干燥10~15钟
7、加入500ul
elution
buffer60℃孵育10~15钟或夜溶解dna用移液器吹打均匀-20℃保存基组dna
三、量全血操作步骤：
10~20ml血量10ml血液处理量例
1、向10ml抗凝剂血液加入2.5倍体积solution
a颠倒混匀8000rpm离5钟弃掉清；
2、再重复步骤1弃掉清
3、按照第3页附表配制solution
b与solution
c混合液（solution
b与solution
c使用量见附表）；
4、加入5ml混合液用性塑料吸管吹打均匀60°c水浴或孵箱孵育10钟孵育期间颠倒混匀溶液由红色变黄绿色或棕色
5、加入等体积异丙醇充颠倒混匀至现丝状或絮状基组dna；
6、用移液器絮状物移加800ul
75%酒精1.5ml
ep管颠倒数12000prm离1钟弃掉清室温干燥10~15钟；
7、加入1000ul
elution
buffer60℃孵育10~15钟或夜溶解dna用移液器或性塑料吸管吹打均匀-20℃保存基组dna

Answer 2

血清/血浆DNA提取试剂盒浓度跟样本量、洗脱体积有关，一般来说用Qiagen、BIOG方法得率都差不多，50微升洗脱体积可以用Qbit测到5-20ng/ul的读数，浓度稍低也没关系，关键还是看pcr检测结果，毕竟浓度太低测到的读书也没有参考意义，还是要以pcr检测结果为准。

Answer 3

要看你做什么用途了，血浆中的游离DNA本身就很少的，我用过天根和杭州昊鑫生物这两家的血浆游离DNA提取试剂盒，总的来说，两家的性能，杭州昊鑫生物的纯度和提取量要略好一点，后续检测的PCR结果也好一点，CT值比天根的要早3个循环左右，而且，杭州昊鑫生物的试剂盒提取耗时短，比较适合样本多的用户。

Answer 4

本来从血浆中提取DNA就不是很容易，要借助提取试剂盒，各种试剂盒之间也存在着差异，我用过的biog系列的DNA提取纯度还是挺高的。