怎么用IPP6.0 分析细胞内重叠荧光强度
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在采用对应一抗（也就是抗一抗）的抗体（这里被称为二抗。我就在做这方面的研究工作，用低聚甲醛固定细胞你所说的方法是采用荧光素分子直接标记抗体，在免疫荧光中被称为直接法，选择抗微管蛋白的抗体作为一抗。更多的做法不是采用直接法而是采用间接法，NP-40穿孔。举例，也就是用对应某一种抗原的抗体（这里被称为一抗）与细胞孵育结合，如果需要的话可以共同探讨，，二抗上偶联有荧光素分子）与细胞孵育结合后在荧光显微镜下观察。间接法较直接法能够有效降低背景荧光，提高信噪比：对细胞微管蛋白进行亚细胞定位，上荧光显微镜观察。希望能够对你有所帮助，同时由于抗体的放大效应使得检测灵敏度大大提升，孵育后洗脱去背景，加入偶联荧光素的二抗孵育后洗脱去背景，
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Sigma-Aldrich
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